バクテリオロドプシン・ミュ-タントの構造・機能解析

细菌视紫红质突变体的结构和功能分析

• 批准号: 01580257
• 负责人: 神山 勉
• 金额: $ 1.02万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01580257/
• 关键词: バクテリオロドプシン; 光プロトンポンプ; レチナ-ル; 柴膜; トリプトファン; 蛍光エネルギ-移動法

バクテリオロドプシン・ミュ-タントの構造・機能を分光学的手法により調べた。(1)膜中深い位置に存在すると予想されている荷電性アミノ酸残基(Asp196)を置換したミュ-タントの光化学反応サイクルおよび光プロトンポンプ活性を調べ,プロントの通り道に関する知見を得た。(西独マックスプラン研究所Oesterhelt博士,理研国際フロンティア・生物素子グル-プ大友純博士との共同研究)(2)トリプトファン残基をフェニルアラニンに置換したミュ-タント(8種類)の光化学反応を調べた。2種類のミュ-タントでトランス反応サイクルの異常が観察された。(米国MIT研究所・Khorana博士らとの共同研究)(3)システイン残基を導入したミュ-タント(e.g.S132c)を用いて,蛍光エネルギ-移動法による構造解析を行なった。システイン残基を蛍光色素で修飾し、エネルギ-移動速度の測定からレチナ-ルとの相対位置を明らかにするための実験を行い、現在、未反応蛍光色素の影響などの評価を行なっている。(米国MIT研究所Khorana博士らとの共同研究)

The structure and functions of the BUCKUTLIOLODOPSIN·MIU-TANT are adjusted by means of spectroscopic methods. (1)The presence of a charged acid residue (Asp196) at a deep position in the membrane is expected to modulate the activity of the photochemical reaction and the passage of light. (Joint research by Dr. Oesterhelt, Institute of Biochemistry, RIKEN International)(2) Photochemical reaction modulation of 8 kinds of biotin residues. 2. The abnormal behavior of the two kinds of drugs was detected. (Joint research with Dr. Khorana, MIT Research Institute, USA)(3) Structural analysis by using the light generation and migration method for introducing residues into the structure (e.g. S132c). Determination of the relative position of the photochrome in the presence of the photochrome residue, and evaluation of the effect of the photochrome on the photochrome. (Joint research by Dr. Khorana, MIT Institute, USA)

项目成果

神山勉,木下一彦: "分光技術ハンドブック" 朝倉書店, 7

神山勉、木下和彦：《分光技术手册》朝仓书店7

Suzuki,S.,Kawato,S.,Kouyama,T.,Kinosita,K.,Ikegami,A.,Kawakita,M.: "Independent flenible motion of submolecular domains of the Ca^<2+>,Mg^<2+>ーATPase of sarcoplasmic reticulum meacured by timeresolved fiuorescence depolarization of siteーspecificially atte

Suzuki, S.、Kawato, S.、Kouyama, T.、Kinosita, K.、Ikegami, A.、Kawakita, M.：“Ca^<2+>、Mg^<2 的亚分子域的独立灵活运动+>ー肌浆网的 ATP 酶通过位点特异性的时间分辨荧光去极化进行测量

Fukuda,K.,Ikegami,A.,NasudaーKoyama,A.,Kouyama,T.: "Effect of partial delipidation of purple membrane on the photodynamics of bacteriorhodopsin." Biochemistry.

Fukuda, K.、Ikegami, A.、Nasuda Koyama, A.、Kouyama, T.：“紫色膜部分脱脂对细菌视紫红质生物化学的光动力学的影响。”

Kouyama,T.,Kinosita,K.,Jr.,Ikegami,A.: "Correlation between internal motion and emission kinetics of tryptophan residues in proteins." Eur.J.Biochem.182. 517-521 (1989)

Kouyama,T.、Kinosita,K.,Jr.、Ikegami,A.：“蛋白质中色氨酸残基的内部运动和发射动力学之间的相关性。”

Kouyama,T.,Nasudaーkouyama,A.: "Turnover rate of the proton pumping cycle of bateriorhodopsin:pH and lightーintensity dependences." Biochemistry.28. 5963-5970 (1989)

Kouyama，T.，Nasuda-kouyama，A.：“细菌视紫红质质子泵循环的周转率：pH 和光强度生物化学。28（1989）。”