単一細胞の分泌・収縮と細胞内機能制御因子群の電気的光学的同時測定装置の試作

用于同时光电测量单细胞分泌/收缩和细胞内功能控制因子的装置原型

• 批准号: 01870110
• 负责人: 矢田 俊彦
• 金额: $ 10.75万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 1990
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01870110/
• 关键词: 同時測定装置; パッチクランプ; 顕微測光; Kチャネル電流; 細胞内カルシウム; 膵β細胞; グルコ-ス; 経口糖尿病薬; 単一膵β細胞

I.装置・手法(1)2または3波長励起高速切換装置を作製した。(2)2・3波長励起に伴なう2・3種蛍光および必要に応じてそれらの比を互々独立にかつ実時間に出力する。光シグナル処理装置を作製した。(3)微小蛍光の安定な測定のために強力でノイズの少ないXeランプを試作した。(4)パッチクランプ実験において、細胞質成分を流出させることなくwhole cell clampする新しい手法を確立した。II.膵B細胞への適用(1)グルコ-ス刺激はその代謝を介してATP依存性Kチャネル(K_<ATP>)を不活性化しその結果Caチャネル活性化と細胞内Ca^<2+>濃度([Ca^<2+>]_i)増加をもたらすことが明らかとなった。(2)経口糖尿病薬トルブタミドには直接K_<ATP>に作用してこれを不活性化しその結果Caチャネル活性化と[Ca^<2+>]_i増加をもたらすことが判明した。(3)インスリン分泌刺激性ペプチド,Glucagon like prptideはCaチャネル活性化を介して[Ca^<2+>]_i増加をもたらすことが明らかとなった。(4)インスリン分泌抑制ペプチド,ソマトスタチンはK_<ATP>チャネル活性化を起こしその結果[Ca^<2+>]_iレベルの抑制をもたらすことが明らかとなった。

I. Device·Method (1)2. 3 Wavelength excitation high-speed switching device control (2)2·3 wavelength excitation 2·3 wavelength excitation and necessary excitation The optical processing device is controlled. (3)The stability of micro-light and the strength of micro-light are tested. (4)The new method of "whole cell clamp" is established. II. Application of B cell culture (1) ATP dependent K_(2 <ATP>+) inactivation and Ca_(2 +) activation to B cell culture (2) ATP dependent K_(2+) inactivation. (2)The results of the direct inactivation <ATP>of [Ca^2+]_i in diabetes mellitus are as follows: (3)The secretion of glucagon-like prptide is stimulated by the activation of [Ca^&lt;2+&gt;]_i (4)The <ATP>results of [Ca^&lt;2+&gt;]_i_i_

项目成果

Nakamura,H.: "Lーargininosuccinate modulates Lーglutamate response in accutely isolated cerebellar neurons of immature rat." Brain Res.(1991)

Nakamura, H.：“Largininosuccinate 调节未成熟大鼠的精确分离的小脑神经元中的 L 谷氨酸反应”（1991 年）。

Yada,T.: "Glucose evokes biphasic change in cytosolic free Ca^<2+> in single pancreatic B-cells." Cell Struct,Funct.14. 921 (1989)

Yada,T.：“葡萄糖在单个胰腺 B 细胞中引起胞质游离 Ca^2 > 的双相变化。”

Yada,T.: "Glucose evokes an initial decrease and subsequent increase in cytosolic free Ca^<2+> in single rat pancreatic Bーcells." Jap.J.Physiol.40. S93 (1990)

Yada, T.：“葡萄糖引起单个大鼠胰腺 B 细胞中胞质游离 Ca^2+ 的最初减少和随后的增加。”Jap.J.Physiol.40 (1990)。

Yada,T.: "Biphasic change of cytoplasmic Ca^<2+> in response to glucose in single Bcells from rats." Proc.Int.Union Physiol.Sci.XVII. 75p (1989)

Yada,T.：“大鼠单个 B 细胞中细胞质 Ca^2 对葡萄糖的双相变化。”

Sharp,G.W.G: "Galanin can inhibit insulin release by a mechanism other than membrane hyperpolarization or inhibition of adenylate cyclase.1989." J.Biol.Chem.264. 7302-7309 (1989)

Sharp，G.W.G：“甘丙肽可以通过膜超极化或腺苷酸环化酶抑制以外的机制抑制胰岛素释放。1989 年。”