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メナキノンの微生物合成と細胞外漏出の機構の解明

阐明甲基萘醌的微生物合成和细胞外渗漏机制

基本信息

批准号：
02660115
负责人：
谷吉樹
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

メナキノン(ビタミンK_2)の微生物をもちいる合成プロセスを開発する研究の一環として、メナキノン合成能の増強されたスルホンアミド耐性変異株の誘導に成功した。本株は、親株と同様に界面活性剤添加培養により菌体外へメナキノンー4を漏出する.メナキノン生産のための培養条件に関する最適化を行ったところ、培養液1リットル当り280mgのメナキノンを生産し、工業的プロセスを開発するための基盤を確立することができた.次いで、上述のスルホンアミド耐性変異株におけるメナキノン合成能の増強の要因を生合成系の酵素活性とその制御の変化から追求するために、野生株及び親株であるヒドロキシナフトエ酸耐性変異株と比較して検討した.その結果,2,3の酵素において明らかなメナキノン合成促進の要因が認められた.さらに、メナキノンの細胞外漏出現象の解析のために休止菌体系を設定し、メナキノンー4が低濃度の界面活性剤添加により漏出するのに対し、メナキノンー6は高濃度添加によっても漏出しないことを認めた。次に、細胞を分画し、メナキノンー4とメナキノンー6の局在性について検討したところ、両メナキノンに差異は認められずともに膜画分に存在していた.休止菌体系における漏出は界面活性剤と接触後直ちに起こることから、膜組成の変化が原因ではない.スフェロプラストからはメナキノンー4のみが漏出し、膜画分からは両メナキノンとも容易に漏出した.すなわち、メナキノンー4の選択的漏出には細胞壁及び膜との親和力は関係がないと考えられる、一方、シクロデキストリンの添加及び細胞の水洗によってもメナキノンー4の選択的漏出が認められた.これらの結果より、細胞膜透過性の差異を界面活性剤が増強している機構を結論とするに至った.

A study on the development of biosynthetic ability of microorganisms in the field of bio-chemistry was carried out, and the induction of resistant mutants was successful. This strain has the same interfacial activity as its parent strain. Optimization of culture conditions for the production and development of industrial culture medium 1 mg/kg In the second place, the enzyme activity of the synthetic system and the control of the enzyme activity of the synthetic system were compared between the wild and parent strains. As a result, 2,3 enzymes are identified as essential factors for synthesis promotion. The analysis of extracellular leakage phenomenon in the medium and high concentration of surfactant was carried out in the medium and high concentration of surfactant. In addition, the cells are divided into four parts: the first part is divided into four parts: the second part is divided into four parts: the third part is divided into four parts: the fourth part is divided The reason for the change of membrane composition is that the system of resting bacteria is leaking out and the interface is active. The film is easy to leak out. The leakage of the selected cell wall and the affinity of the selected cell membrane are identified by the addition of the selected cell wall and the selected cell membrane. The results showed that the interfacial activity of cell membrane permeability was increased, and the mechanism of cell membrane permeability increased.