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卵巣顆粒膜細胞の分化過程におけるLH受容体タンパクの発現と糖鎖のプロセシング

卵巢颗粒细胞分化过程中LH受体蛋白表达及糖链加工

基本信息

批准号：
02660269
负责人：
服部眞彰
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

顆粒膜細胞の分化過程において、ガングリオシドGM_3及びGM_1が細胞表面に出現することを見い出した。ガングリオシドは細胞間情報伝達及び細胞成長因子受容体活性の変動に関与することが考えられているので、LH受容体発現におけるガングリオシドの役割を検討した。(1)細胞培養系にGM_3を添加すると、細胞の状態によってLH受容体の発現が促進あるいは抑制された。細胞表面でのGM_3含量が高い時では、外因性GM_3はLH受容体発現を約2倍に促進した。逆にGM_3含量が低い時では、外因性GM_3は受容体発現を抑制した。(2)細胞表面に出現するGM_1にGM_1のリガンド(コレラトキシンBサブユニットあるいはGM_1抗体)を結合させて、LH受容体の発現への影響を調べた。前述と同様に細胞の状態によって反応が異なった。GM_1含量が最大に達する様な条件では、細胞はGM_1リガンドに対して不応状態となり、GM_1含量が少ない時ではLH受容体発現は約2倍に促進された。このように外部から細胞表面のガングリオシドに手を加えた場合、培地中のcAMP含量にも変化があることから、cAMP依存性キナーゼに関接的に影響を及ぼすことが推察された。さらに、顆粒膜細胞でのガングリオシド合成を制御する因子を検討した結果、FSH、インスリン、EGF、FGFなどが明らかにされた。また、タンパク質の脱リン酸化酵素阻害剤オカダ酸を用いた実験では、タンパクリン酸化によってGM_3合成が上昇することを明らかにし、細胞内のタンパク質のリン酸化状態がガングリオシド合成を制御する大きな理由であることが決論付けられた。また、LH受容体のカルボキシ末端合成ペプチドに対する抗体は組織化学的方法から細胞LH受容体と反応することが証明された。

During the differentiation process of granular membrane cells, GM_3 and GM_1 appeared on the cell surface. The relationship between the expression of cellular information and the activity of cell growth factor receptors is discussed. (1)The growth of LH receptor was promoted or inhibited by the addition of GM_3 to cell culture system. When the GM3 content on the cell surface was high, the exogenous GM3 and LH receptor formation were promoted by about 2 times. When the content of GM_3 is low, the occurrence of GM_3 receptor is inhibited. (2)GM_1 antibody binding on the cell surface and LH receptor expression were modulated. The same cell state as described above is different. If the GM_1 content is maximum, the cells will be in an unstable state without GM_1, and if the GM_1 content is very low, the LH receptor production will be promoted by about 2 times. The cAMP content in the culture medium changes due to the change of cAMP content, cAMP dependence, and the influence of different factors on the cell surface. The results of the study on factors controlling the synthesis of FSH, EGF and FGF in granulosa cells are as follows: In addition, it was found that there were many reasons for the inhibition of GM3 synthesis in the intracellular deacidification state. The results of histochemical methods for the synthesis of anti-LH receptor antibodies were presented.