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デッドエンド遺伝子を使ったニワトリ始原生殖細胞の発生メカニズムの解明

利用死端基因阐明鸡原始生殖细胞的发育机制

基本信息

批准号：
19658099
负责人：
服部眞彰
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19658099/
关键词：
始原生殖細胞生殖系列特異的タンパク質生殖細胞の発生・分化免疫組織化学リコンビナント抗血清 dead end遺伝子組換えタンパク質 CVH遺伝子 DAZL遺伝子 NANOG遺伝子抗体発生プロモーター解析鳥類

项目摘要

本研究では,Cdaz1,CdhおよびCvh遺伝子のcDNA情報から特異的抗体を作製して,生殖細胞の発生・分化に伴う変化を免疫組織化学的に解析した。15胚日齢と30日齢の精巣および卵巣をサンプルとしたウエスタンブロッティングでは,抗CDH抗体および抗CVH抗体のいずれの場合もシングルバンドとして検出された。これに対して,抗CDAZL抗体は両精巣と15胚日齢の卵巣でシングルバンドが検出されたが,30日齢の卵巣ではバンドは検出されなかった。いずれの抗体も高い特異性を示したが,ステージによってはDAZLタンパク質の発現が減少していることが考えられた。そこで、生殖隆起に到達する前のPGCと上記の性腺サンプルを用いて二重免疫組織化学を行った。PGCではこれら生殖細胞系列のタンパク質は全て陽性反応を示した。発生が進んだ7および15胚日齢では,精巣および卵巣はすべての抗体に陽性反応を示し,さらに30日齢の精巣でもすべての抗体に陽性反応を示した。これに対して,30日齢の卵巣では多くの卵毋細胞が抗CVHおよび抗CDH抗体に陽性反応を示したが,卵毋細胞の約25%がCVH陰性であった。興味あることに,抗CDAZL抗体に対して卵毋細胞は殆どが陰性であった。さらに成熟精巣ではいずれのタンパク質も陽性であったが,CDAZL陽性細胞やCVH陽性細胞と比較すると,CDH陽性細胞がより精細管の基底膜側に分布していることが認められた。生殖系列特異的タンパク質は細胞内局在が異なるだけではなく,配偶子形成に伴って著しい発現の変化が見られることが明らかとなった。これらタンパク質のうち最も長く発現を持続するのがCVHであり,精毋細胞や卵毋細胞など配偶子形成の後半まで発現が認められた。また,CDHは卵毋細胞で発現が認められたが,CVH陽性の精毋細胞ではCDHは発現せず雌雄の相違が示唆される。これに対して,減数分裂に関与すると考えられているCDAZLは卵毋細胞での発現が消失する一方で,CVH陽性である精毋細胞では発現が認められたことから,雌雄間の発現時期の相違に注目される。少なくとも,CDAZLおよびCVHは精子形成期の減数分裂後半までmRNAの核から細胞質への移送に必要であることが示唆される。

In this study, the antibodies specific to Cdaz1,Cdh-specific Cvh genes were detected, and the reproductive cycle cells were differentiated with immunocytochemical analysis. On the 30th day of the gestation, the eggs were divided into two groups: the egg, the egg and the egg. The anti-CDAZL antibody was detected on the 15th day and the 30th day after the birth of the egg. The antibody has a high specificity and shows that there is a decrease in the number of antibodies in the DAZL test. The gonadal gland was detected by double immuno-histochemistry in PGC before reaching the stage of pregnancy and reproductive eminence. The series of PGC reproductive cells showed sexual responses in the whole series. The baby was born on the 7th day, the 15th day, the egg, the egg, the antibody, the antibody, the antibody and the antibody. On the 30th, the number of eggs showed that there were no cells, anti-CVH, anti-CDH antibodies, and about 25% of the eggs were CVH. The anti-CDAZL antibody has no effect on the egg, and the anti-DNA antibody has no effect on sex. The mature spermatozoa, the spermatozoa, the basement membrane of the seminal tubules, the basement membrane of the spermatozoa, the CDAZL, the spermatozoa, the basement membrane of the spermatozoa, the mature sperm, the CVH, the CDH, the sperm, the basement membrane, the basement membrane. In the reproductive series, the intracellular situation of the reproductive series is in the cell, and the mating forms a companion, a companion, a doctor, and a baby. The most important thing is that the most important thing is that you have a problem with CVH, that you don't have a cell, and that the second half of the mating is formed. The oocytes of CDH were found to be abnormal, while those of CVH were found to be instigated to each other by CDH. The results of meiosis, meiosis and DNA sequencing showed that the CDAZL eggs were found to have disappeared, while the cells of CVH were not detected, and both sexes paid close attention to each other at the same time. During the spermatogenesis period, CDAZL

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Progesterone, but not estradiol, synchronizes circadian oscillator in the uterus endometrial stromal cells

DOI：
10.1007/s11010-008-9981-4
发表时间：
2008
期刊：
Molecular and Cellular Biochemistry
影响因子：
4.3
作者：
Masami Hirata;Pei-jian He;N. Shibuya;M. Uchikawa;N. Yamauchi;S. Hashimoto;M. Hattori
通讯作者：
Masami Hirata;Pei-jian He;N. Shibuya;M. Uchikawa;N. Yamauchi;S. Hashimoto;M. Hattori

ニワトリ生殖細胞の発生・分化に伴う生殖系列特異的タンパク質の発現相違

鸡生殖细胞发育和分化过程中种系特异性蛋白表达的差异

DOI：
发表时间：
2010
期刊：
影响因子：
0
作者：
Kubota K;Yamauchi N;Matsumoto K;Watanabe R;Oozono S;Aramaki S;Wood C;Soh T;Hattori M-A;木藤学志・荒牧伸弥・田中浩嗣・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰
通讯作者：
木藤学志・荒牧伸弥・田中浩嗣・宗知紀・山内伸彦・服部眞彰

Molecular cloning and expression of dead end homologue in chicken germ cells

鸡生殖细胞死端同源物的分子克隆和表达