5.7ーDHT投与後,ラット青斑核におけるセロトニン免疫組織化学的研究

5.7 - DHT 给药后大鼠蓝斑的血清素免疫组织化学研究

• 批准号: 02670509
• 负责人: 飯島 浩一
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Akita University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02670509/
• 关键词: Locus coeruleus; serotonin synthesis after loading; neurotoxin; PAP method; Immunohistochemistry; rat; uptake blocker

ウイスタ-ラットの青斑核のセロトニン免疫反応性(5ーHTーIR)をunlabelied peroxidaseーantiperoxidase(PAP)methodにより検討した。抗体生成はGrotaとBrown('74)の方法に従った。青斑核を含むslabの5μmcryostat連続切片を作製し、交互に5ーHT反応とcresylーviolet染色を施し比較観察した。5,6ーdihydroxytryptamine(5,6ーDHT)又は,5,7ーDHTを術前1〜4日にラット側脳室へ電気泳動的に注入し、次にMAO阻害剤pargyline(75mg/kg)と5ーHTP(200mg/kg)を2hと1hほどperfusion前に注入してから、5ーHTーIRを検出すると脱マスクされた状況で青斑核神経細胞の陽性反応を検出できる。小脳と縫線核を陽性対照群、正常ウサギ血清や生理的食塩水を陰性対照群に用い、神経細胞数はSwanson('76)により3.285±25を基準とし、computer(CosmosomesーS Nikon)を用いて統計学的処理を部分的に実施した。神経細胞の分類法はLaughlinら('86)に従った。青斑核の全体にわたってすべての型の半数以上の神経細胞が5ーHTーIRを示したが、ことにcore cellsがdominantであった。5ーHT uptake blockerであるLillie 110140は青斑核内部で5ーHTーIR減少を示さなかった。血管内皮細胞が5ーHTの血液ー脳関門であるとの従来の説は死後数分間に起こる現象に由来する可能性が強い。5,6ーDHT又は5,7ーDHTの術前投与を行ったすべての例で、青斑核の少なくとも半数の神経細胞が5ーHTーIRを示した事は、青斑核の背側縫線核などからの5ーHTergic axon terminalsを神経毒で除外しても、有意の量の5ーHTが青斑核内に合成される事を強く示唆する。Lillie 110140投与の無効の結果を考えて(1)青斑核の多数の神経細胞が、本来、血液からの5ーHTPを素材として5ーHTを生産する能力を保有する事、(2)この能力は青斑核自体がもつ強いMAO活性によってマスクされていると結論する。この研究成果はActa histochemica vol 89.p.141ー156(1990)に原著論文として発表する。

ウ イ ス タ - ラ ッ ト の green spot nuclear の セ ロ ト ニ ン immune against 応 sex (5) ー HT ー IR を unlabelied peroxidase ー antiperoxidase (PAP) method に よ り beg し 検 た. Antibody production と GrotaとBrown('74) <s:1> method に従った. Green spot nuclear を containing む slab の 5 mu McRyostat even 続 し the slice を cropping systems, interactive に ー 5 HT against 応 と cresyl ー violet dye を し compare shi 観 examine し た. 5 or 6 ー dihydroxytryptamine (5, 6) ー DHT は again, を preoperative 1 ~ 4, 5, 7 ー DHT に ラ ッ ト side 脳 chamber へ electric 気 swimming に に injection し, time MAO resistance against tonic pargyline (75 mg/kg) と ー 5 HTP (200 mg/kg) を 2 h と 1 h ほ ど per Fusion before に injection し て か ら, 5 ー HT ー IR を 検 out す る と マ off ス ク さ れ た condition で green spot 経 cell nuclear god の positive anti 応 を 検 out で き る. Small 脳 と suture nuclear を positive polices according to group, normal ウ サ ギ や physiological food salt water を negative serum according to the group of seaborne に い, god 経 cell number は Swanson (' 76) に よ り 3.285 + / - 25 を benchmark と し, computer (Cosmosomes ー S Nikon) を with い て statistical 処 principle part of を に be applied し た. The Shinto cell classification system に従った Laughlinら('86)に従った. Green spot all nuclear の に わ た っ て す べ て の type の half の god 経 cells が ー 5 HT を ー IR shown し た が, こ と に core cells が dominant で あ っ た. 5 <s:1> HT uptake blockerであるLillie 110140 <s:1> internal で5 <s:1> HT <s:1> IR reduction を shows さな さな った った. Vascular endothelial cell が ー 5 HT の blood ー 脳 masato door で あ る と の 従 の said は after the death of several points between に up こ る phenomenon に origin す が strong い る possibilities. 5, 6 and 5, 7 ー は ー DHT DHT の preoperative cast with を っ た す べ て で の cases, little green spot nuclear の な く と も half の god 経 cells が ー 5 HT を ー IR shown し は た, green nuclear の seamline nuclear back な ど か ら の 5 ー HTergic axon Terminals を except god 経 poison で し て も, intentionally の の ー 5 HT が green spot within the nuclear に synthetic さ れ る matter を く and shown strong sucking す る. Lillie 110140 cast no working with の の results を exam え て (1) most green spot nuclear の の god が 経 cells, originally, blood か ら の ー 5 HTP を material と し て ー 5 HT を production す る ability を retain す る, (2) こ の ability は green spot nuclear autologous が も つ strong い MAO activity に よ っ て マ ス ク さ れ て い る と conclusion す る. The research results of する する Acta histochemica vol 89, p.141, 156(1990)に original paper と て て publication する.

项目成果

Koichi Iijima,Kazuo Otomo,Tetsuro Ogawa & Ryoji Kobayashi: "The distribution of serotonin immunoreactivity in the rat locus coeruleus after intraventricular injections of either 5,6ー or 5,7ー dihydroxytryptamine with special refrence to serotonin synthesis

Koichi Iijima、Kazuo Otomo、Tetsuro Okawa 和 Ryoji Kobayashi：“脑室注射 5,6ー 或 5,7ー 二羟色胺后，大鼠蓝斑内血清素免疫反应性的分布，特别涉及血清素合成