权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

上皮増殖因子受容体異常を指標とした膠細胞腫の新しい分子診断法の開発

以表皮生长因子受体异常为指标开发胶质瘤新分子诊断方法

基本信息

批准号：
03152123
负责人：
上山義人
金额：
$ 2.88万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03152123/
关键词：
神経膠腫上皮増殖因子受容体 RTーPCR 遺伝子増幅遺伝子再構成

项目摘要

本研究は通常の病理組織学的な検索では判定しにくい神経膠腫(膠細胞腫)の悪性度を、上皮増殖因子受容体(Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR)の異常を分子生物学的に解析することによって判定する、新しい診断法開発を目的としている。我々はヒト脳腫瘍ヌ-ドマウス移植株20株についてEGFR遺伝子の異常をサザンブロット法で解析し、膠芽腫株3株で遺伝子増幅、再構成を認めた。このEGFR遺伝子の再構成様式は各細胞株でそれぞれ異なるものの、いずれも第2exonから第7exonの欠失を形で生じていた。このEGFR遺伝子欠失、再構成は悪性度の高い膠芽腫で好発しており、臨床病理学的に悪性度指標となりうることを示唆された。このEGFR遺伝子の異常判定を診断に利用するためには、少量の臨床材料からも検出できるようにする必要がある。そこで、我々はEGFR遺伝子欠失部位をはさむ形でPCR用のプライマ-を第1exonと第8exon内に設計し、逆転写PCR(RTーPCR)を腫瘍材料細胞全RNAについて行った。その結果、腫瘍材料から精製したRNAをもとに、EGFR遺伝子の再構成を高感度に検出できる技術を確立した。現在までに、神経膠腫15例、髄膜腫7例、神経鞘腫2例、転移性脳腫瘍7例の31例の脳腫瘍材料について、このRTーPCRを用いたEGFR遺伝子の解析を行った。上記のEGFR遺伝子の欠失再構成は神経膠腫の一型である異型星状膠細胞腫3例においてのみ認められ、神経膠腫の悪性度と密接な関連が示唆されたが、尚、EGFR遺伝子の異常と腫瘍の組織型との関連についての考察は十分ではない。研究をさらに発展させ臨床診断に応用するために、EGFR遺伝子の構造異常を直接、神経膠腫細胞上に同定するためのin situ hybridization法の応用を検討している。

In this study, we usually use histopathology to determine the degree of specificity of mammalian cells, the analysis of molecular biology of epithelial proliferative factor receptors (Epidermal Growth Factor Receptor,EGFR), and the new method to determine the molecular biology of ovarian cancer. I said that 20 plants were transplanted in the form of EGFR seeds, and that the seeds of 3 buds were analyzed and identified. The EGFR seeds were reorganized into the following patterns: each cell line, each cell line, the second exon, the seventh exon, the lack of shape, the mother, the mother, the second, the seventh, the seventh, the second, the seventh, the If the EGFR is missing, then it will show that the sex is high, the bud is good, and the sex index of the pathology of the bed. It is often determined that the use of a small amount of material in the bed may be necessary for the use of EGFR materials. The missing parts of the missing parts of the EGFR were designed and reverse-written PCR (RT-PCR) was used to design the internal design and reverse-write the whole RNA of the missing parts of the PCR. The results of the test, the materials were used to analyze the RNA system, and the EGFR system was reorganized into a high-sensitivity device to ensure the establishment of the equipment technology. At present, there are 15 cases of EGFR, 7 cases of membrane, 2 cases of sheath, 7 cases of transferable disease, 31 cases of transplant disease, and the analysis of EGFR PCR is used to analyze the disease. In the previous study, the deficiency of the EGFR child was reorganized into a cluster of stellate cells of the first type, in 3 cases, and the degree of sex was closely linked to that of the mother, the mother, the mother In this paper, the authors studied the application of the in situ hybridization method in the study of the development of the bed, the use of the machine, the use of the EGFR, the direct and the co-determination of the cell in the cell.