权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

上皮増殖因子受容体のアンチセンスを用いた肝癌の治療

使用表皮生长因子受体反义治疗肝癌

基本信息

批准号：
10877191
负责人：
稲本俊
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

癌のmicroenvironmentである低酸素で高EGF受容体結合能を示す肝癌細胞Hep3Bに、lipofectionを用いEGF受容体遺伝子のantisenseを導入すると、そのEGF受容体結合能を約50%まで低下させるζとができた。しかしEGF受容体は正常肝細胞にも存在し、多種の生理機能に関与していると考えられることから、.腫瘍特異的な遺伝子発現法が不可欠であり次にそれを検討することとした。まず癌のmicroenvironmentである低酸素環境を利用した遺伝子発現法を試み、低酸素誘導遺伝子の転写調節因子hypoxia inducible factorの結合する低酸素応答エレメント下流に低酸素誘導遺伝子のひとつであるエリスロポエチンのプロモーターおよびレポーター遺伝子としてジフテリア毒素のA fragmentをligationしたプラスミドを作成した。これをCMV-luciferaseプスミドとco-transfeεtionし、常酸素下と低酸素下のluciferase活性で細胞生存率を比較することにより低酸素によるジフテリア毒素A fragment遺伝子の誘導を検討したが、細胞生存に、酸素環境による差が認められなかった。ジフテリア毒素A framgmentは一分子でも細胞殺傷能を示し、この強い毒性のため低酸素応答エレメントに依存する遺伝子発現の差が検出できない可能性を考慮し、毒素活性が35分の1、および120分の1のジフテリア毒素A fragment mutantをligationしたプラスミドも作成し、常酸素下と低準素環境下での遺伝子発現を比較したが、細卿生存に酸素環境による差が認められなかった。そこで現在は腫瘍特異的な遺伝子発現法として細胞増殖依存性の遺伝子発現を試みる予定である。正常肝では肝細胞はG0期にあることからGl-S期に働くサイクリンのプロモーターを利用しての腫瘍特異的な遺伝子発現法を考慮中であり、preliminaryながら細胞増殖依存性に遺伝子発現が起こっている結果が得られている。今後はこのプロモーターを利用した遺伝子発現系を用い腫瘍特異的にEGF受容体のantisenseを導入することにより、癌のmicroenvironmentにより結合能が高くなる肝癌細胞のEGF受容体をプロックする系の完成を目指す予定である。

Cancer microenvironment is low in EGF receptor binding energy, which is about 50% lower than that of Hep3B cells. EGF receptor is related to the existence of normal liver cells and various physiological functions. The method of discovery of a specific gene cannot be ignored. A method for the detection of hypoxia-inducible gene by using hypoxia-inducible gene regulatory factor in cancer microenvironment was developed. The hypoxia-inducible gene regulatory factor was combined with hypoxia-inducible gene regulatory factor. Comparison of cell survival rates of CMV-luciferase activity between low and high levels of co-transfe tion, low and high levels of co- The toxin A fragment fragment was prepared by comparing the cell killing activity of a molecule with that of a molecule with high toxicity, low toxicity, and low toxicity. The probability of differential detection of the toxin A fragment was considered. The toxin activity was 35 points and 1 point. The toxin A fragment was 120 points and 1 point. The environment for survival is very different from the environment for survival. The method of gene development specific to the tumor and the method of gene development dependent on cell proliferation are studied. In normal liver, the liver cells in G0 phase are transformed into G1-S phase, and the gene expression method specific to tumor is considered. The preliminary results show that the gene expression depends on cell proliferation. In the future, the use of EGF receptor in the production system of liver cancer cells can be achieved by introducing anti-EGF receptor into the tumor microenvironment.