リコンビナント水痘生ワクチンによって発現されたHBs抗原の解析

重组水痘活疫苗表达的HBs抗原分析

• 批准号: 03670233
• 负责人: 白木 公康
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1991
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1991 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03670233/
• 关键词: リコンビナント水痘生ワクチン; HBs抗原の糖鎖構造; Oー型糖鎖; Nー型糖鎖; HBs抗原

水痘生ワクチンは、免疫不全状態にある白血病児に対しても、安全に使用できるような高度弱毒生ワクチンとして開発され、世界中で使用されています。この水痘生ワクチンウイルス遺伝子にHBs抗原遺伝子を組み込んで、リコンビナント水痘生ワクチンを開発した。この研究では、ウイルス感染細胞内でのHBs抗原の合成・細胞外への分泌過程をpulseーchase labeling実験、糖代謝阻害剤(TunicamycinとMonensin)、種々のglycosidase(Nーglycosidase,Oーglycosidase,neuraminidase)処理により明らかにした。HBs抗原は、26Kの蛋白として合成されとNーグリコシド結合によるNー型糖鎖(High mannose型)の修飾を受け30Kの糖蛋白となる。これらの蛋白間で、disulfide(SーS)結合により26Kー26K・26Kー30K・30Kー30Kの3種のDimerとして、Golgi装置でそれぞれのsubunitにOーグリコシド結合によりOー型糖鎖が付加される。また、Nー型糖鎖は、High mannose型糖鎖からComplex型糖鎖へと変換される。こられの修飾によって、26K蛋白は30K蛋白に、30K蛋白は35K蛋白となり、30Kー30K・30Kー35K・35Kー35Kの3種のdimerとなる。これらの修飾に伴いHBs抗原は、細胞外へHBs抗原粒子として分泌される。この生合成・修飾・分泌過程は、早いものでは1時間以内であった。また、逆に、4時間後まで細胞外に分泌されないで26Kと30Kの蛋白として細胞内に検出されるHBs抗原が存在していた。Oーグリコシド結合の存在は、このHBs抗原の発現系に特異的と考えられる。HBs抗原の糖鎖構造は、HBs抗原自身の安定性に寄与し、また、その抗原性の増強作用があることが知られており、本研究で明らかにしたHBs抗原の糖鎖による修飾は生物学的・免疫学的に非常に重要な意義を持つものと考えられる。

Vaccinia virus infection, immune deficiency syndrome leukemia virus infection, safe use of vaccine vaccine, highly attenuated virus vaccine, infectious disease in the world, and vaccination in the world. The recombinant vaccine of varicella and HBs antigen was used to detect the antigen of varicella, and the vaccine was used. Objective: to study the synthesis and secretion of pulse glycosidase (HbsAg) and extracellular antigens (ECS) in infected mice, including pulse glycosidase (Glycosylated Monensin), glucopyranosidase (neuraminidase) and glycosidase (neuraminidase). HBs antigen and 26K protein were synthesized and modified by 30K glycoprotein conjugate (High mannose type). The combination of protein and disulfide (Sons) was used in combination with the combination of subunit, subunit and 30K, 26K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K, 30K and 30K, respectively. Sugar, nitrogen sugar, High manose, complex sugar, sugar, sugar. Protein 30K, 30K protein, 30K protein, 30K protein, 35K protein, 35K protein, HBs antigens and extracellular HBs antigens were secreted by HBeAg particles. The synthesis and repair of aspartame can be secreted within 1 time after the process of synthesis and early secretion. After incubation, reverse reaction and 4 hours later, the expression of HBs antigen was detected in the extracellular secretion of HBeAg, the protein of 26K and 30K and the expression of HBs antigen in the cell. In combination with the presence of HBV antigens, the presence of HBs antigens is a specific marker. HBs antigen glucose production, HBs antigen self-stability to strengthen the role of antigenicity, in this study, the immunology of biology is very important.