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IgA単独欠損症におけるILー5、TGFーβ2遺伝子導入療法の試み。

IL-5 和 TGF-β2 基因转移疗法治疗 IgA 孤立性缺陷的试验。

基本信息

批准号：
03670487
负责人：
宮川幸昭
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至 1992
项目状态：
已结题

项目摘要

平成元年、平成2年の科学研究費を使用した研究から、遺伝子導入細胞としてストロ-マ細胞の優秀性を証明してきた(J.Immunol.,J,Exp.Med.)。これらの研究からリンパ系幹細胞への遺伝子導入と導入リンパ系幹細胞の増殖分化にストロ-マ細胞の存在が必須うであることが判明した。平成3年度は、IgA単独欠損症のリンパ系幹細胞へのILー5およびTGFーβ2遺伝子の導入とこれを育成するストロ-マ細胞の培養系の確立を試みた。1)リンパ系幹細胞の樹立:CD34陽性の多岐分化能を保有する幹細胞をストロ-マ細胞上に長期培養することによりリンパ系幹細胞を樹立した。繊維芽細胞増殖因子(FGF)及びGMーCSFを基本的に添加培養し、B系細胞はILー7を、T系細胞はILー5とILー2を添加することにより誘導することが出来た(J.Immunol.,J.Exp.Med)。2)ストロ-マ細胞の樹立:パコ-ル比重遠沈法により40%層以上に母細胞が濃縮される。この細胞を磁力線培養装置でFGFおよび内皮細胞増殖因子(ECGS)存在下で培養することにより約2週間で大量のストロ-マ細胞の単層培養が形成され、4週間で多層培養層が式成された。3)遺伝子導入:IgA単独欠損症のリンパ系幹細胞にILー5及びTGFーβ2の遺伝子をパルス導入装置を使用して導入した。この細胞をストロ-マ細胞上で培養することにより多量のIgA含有細胞まで誘導するこに成功したが分泌細胞まで誘導することはできなかった。4)分泌細胞誘導:現在各種のサイトカインを使用してIgAの分泌細胞への誘導を試みているが現在のところPMA(phorbol miristateacetate)で細胞周期の同調が必要である。考案リンパ系幹細胞にILー2及びILー5の遺伝子導入及び導入細胞の増殖分化までは比較的簡単に実施し得たが分泌細胞への誘導が困難であった。今後の研究は如何にして分泌細胞へ誘導できるかが鍵となろう。しかし今後の臨床応用に関してはILー5、TGFーβ2及びインタ-フェロンのサイトカインカクテル療法の開発が急務となろう。

, Ping Cheng 2 years of "Scientific Research", the use of scientific research, the use of "cell", "beauty", "beauty" and "exp. Med." In this study, it is necessary to determine whether there is a need for the existence of a single cell, which is necessary for the existence of cell differentiation. In the year of Pingcheng and IgA, there was an established test for the establishment of a cell culture system, in which the cells were bred and bred in the first year of Pingcheng and IgA in the first year of the year, including IL, 5, TGF and β 2 cells. 1) the differentiation of CD34 phenotypic polyploidy can retain the long-term growth of supernatants. FGF and basic additive culture of GM CSF, IL 7 of B cell, IL 5 of T cell and 2 cell of T cell (J.Immunol.j.Exp.Med). 2) the specific gravity of the mother cell is more than 40%. In the presence of FGF cell culture and endothelial cell proliferation factor (ECGS), a large number of cell cultures were formed in about 2 years, and in 4 years, a large number of cells were formed in the presence of endothelial cell proliferation factor (ECGS). 3) introduction of IgA mononuclear syndrome (IgA), cell cycle (IL) 5 and TGF (β 2) cell input device. There is a large amount of IgA in the supernatant of cells in which the cells are secreted successfully. 4) secretory supernatant guidance: now all kinds of PMA (phorbol miristateacetate) cells are the same as those necessary for the use of secretory IgA to guide the cell cycle. In the case study, IL 2 and IL 5 were introduced into the cells and the differentiation of colonies were compared. The secretion of the cells led to the growth of the cells. In the future, we will study how to secrete cells and guide them in the future. In the future, emergency treatment will be carried out by using the following emergency treatment methods, such as IL-5, TGF-β 2, and health care.