ウシ白血病牛における上皮小体関連タンパクの発現

牛白血病相关甲状旁腺蛋白的表达

• 批准号: 05760248
• 负责人: 岡田 洋之
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Rakuno Gakuen University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05760248/
• 关键词: ウシ白血病; 上皮小体関連タンパク; ポリメラーゼ連鎖反応; 免疫組織化学

ヒトTリンパ腫やイヌのリンパ肉腫では、これに合併して高カルシウム血症が認められ、その原因物質として腫瘍細胞が産生分泌する上皮小体関連タンパク(PTHrP)が着目されている。一方、地方病性ウシ白血病牛でもまれに高カルシウム血症が随伴してみられる(<5%)。そこで、全身諸所にリンパ肉腫が認められた地方病性ウシ白血病5頭から放血殺後ただちに腫瘍組織を取りだし液体窒素で凍結後、腫瘍組織よりmRNAを抽出し、ヒト上皮小体関連タンパク(PTHrP)のcDNA塩基配列を参考に作製したプライマー(PTHrP F2;5'-TCAGCTCCTCCATGACAAGG-3',PTHrP R1;5'-TCAGCAGAGACCTTCCAAGG-3')を用いて、逆転写酵素反応ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)を行い、ウシリンパ肉腫にPTHrPの発現が認められるか検索した。その結果、対照材料として用いたウシの視床下部ならびに上皮小体から抽出したmRNAを使用してRT-PCRを行ったところ、アガロースゲル電気泳動により約440bpのバンドが検出された。一方、リンパ肉腫組織より抽出したmRNAを用いてRT-PCRを行ったところバンドは認められなかった。検索した5例の血清カルシウム値は9mg/d1以下であり、高カルシウム血症は認められなかった。またホルマリン固定組織標本を抗PTHrP抗体を用いて免疫染色を行ったところ、対照として用いた皮膚表皮は強陽性に染まったが、リンパ肉腫組織は陰性であった。以上の結果から、血清カルシウム値が正常範囲内の地方病性ウシ白血病牛の腫瘍細胞におけるPTHrPのタンパクならびに遺伝子レベルでの発現が認められる可能性は極めて低いことが示唆された。しかしながら地方病性ウシ白血病牛で高カルシウム血症を合併する例における成因を明らかにする課題が残された。

ヒ ト T リ ン パ swollen や イ ヌ の リ ン パ meat swollen で は, こ れ に merger し て high カ ル シ ウ ム hematic disease が recognize め ら れ, そ の reason material と し が て swollen sores cells secrete す る epithelial corpuscle masato even タ ン パ ク (PTHrP) が mesh さ れ て い る. One party, endemic ウシ leukemia in cattle で まれに まれに hyperカ シウム シウム emia が accompanied by <s:1> てみられる(<5%). そ こ で, whole body by に リ ン パ meat swollen が recognize め ら れ た endemic sex ウ シ leukemia 5 head か ら bleeding after killing た だ ち に swollen sores organization を take り だ し liquid smothering element で after freezing, swollen sores よ り mRNA を spare し, ヒ ト epithelial corpuscle masato even タ ン パ ク (PTHrP) の cDNA salt base with column を reference に cropping し た プ ラ イ マ ー (PTHr P F2; 5'-TCAGCTCCTCCATGACAAGG-3',PTHrP R1; 5 '- TCAGCAGAGACCTTCCAAGG - 3') を い て, inverse planning write enzyme reverse 応 ポ リ メ ラ ー ゼ chain against 応 (rt-pcr) line を い, ウ シ リ ン パ meat swollen に PTHrP の 発 が now recognize め ら れ る か 検 cable し た. そ の results, according to material と seaborne し て in い た ウ シ の depending on the lower part of the bed な ら び に epithelial corpuscle か ら spare し た mRNA を use し を line っ て RT - PCR た と こ ろ, ア ガ ロ ー ス ゲ ル electric 気 swimming に よ り about 440 bp の バ ン ド が 検 out さ れ た. One party, リ ン パ meat swollen tissue よ り drew し た mRNA を with い を line っ て RT - PCR た と こ ろ バ ン ド は recognize め ら れ な か っ た. 検 cable し た 5 cases の serum カ ル シ ウ ム numerical は 9 mg/d1 following で あ り, high カ ル シ ウ ム hematic disease は recognize め ら れ な か っ た. ま た ホ ル マ リ ン fixed tissue samples を PTHrP antibody を resistance with い immune dyeing line を っ て た と こ ろ, polices according to と し て in い た skin epidermis は strong positive に dye ま っ た が, リ ン パ meat swollen tissue は negative で あ っ た. の above results か ら, serum カ ル シ ウ ム numerical が within normal fan 囲 の endemic sex ウ シ leukemia cattle の swollen sores cells に お け る PTHrP の タ ン パ ク な ら び に posthumous son 伝 レ ベ ル で の 発 が now recognize め ら れ る は extremely likely め て low い こ と が in stopping さ れ た. し か し な が ら endemic sex ウ シ leukemia cattle で high カ ル シ ウ ム hematic disease を merger す る example に お け る causes を Ming ら か に す る subject が residual さ れ た.

项目成果

Okada H,Merryman JI,Rosol TJ,and Capen CC: "Effects of humoral hypercalcemia of malignancy and gallium nitrate on thyroid C cells in nude mice." Veterinary Pathology. 31(in press). (1994)

Okada H、Merryman JI、Rosol TJ 和 Capen CC：“恶性肿瘤体液高钙血症和硝酸镓对裸鼠甲状腺 C 细胞的影响”。

Okada H,Capen CC and Rosol TJ.: "Immunohistochemical demonstration of parathyroid hormone-related protein in sheep thyroid gland." Veterinary Pathology. 31(in press). (1994)

Okada H、Capen CC 和 Rosol TJ.：“绵羊甲状腺中甲状旁腺激素相关蛋白的免疫组织化学演示。”

Okada H,Merryman JI,Capen CC and Rosol TJ: "Ultrastructural and histomorphometric evaluations of gallium nitrate on bone in nude mice bearing a canine adenocarcinoma" Veterinary Pathology. 31(in press). (1994)

Okada H、Merryman JI、Capen CC 和 Rosol TJ：“携带犬腺癌的裸鼠骨上硝酸镓的超微结构和组织形态学评估”兽医病理学。