嗅上皮の再生におよぼす神経成長因子の影響

神经生长因子对嗅上皮再生的影响

• 批准号: 05771310
• 负责人: 三輪 高喜
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771310/
• 关键词: 神経成長因子; insitu hybridization; 嗅神経

抗NGFR抗体を用いた免疫組織化学的手法により、嗅上皮の再生にはNGFRが関与していることが証明されたが、NGFの免疫組織化学法はなかなかうまくいかなかった。そこで、マウスNGFcDNAを用いたinsituハイブリダイゼーション法により嗅覚系におけるNGFの発現を観察した。用いたプローブはマウスNGFcDNAの一部である340bpを含むプラスミドDNAのpmNGF102である。このDNAにニックトランスレーション法を用いてビオチンを標識して使用した。標本は成熟雄マウス及びラットの顎下腺、嗅球、嗅上皮で、顎下腺は正常コントールとして用いた。固定液は4%パラフォルムアルデヒドを用いた。凍結切片でマウス顎下腺、嗅球で陽性所見を認めたが、マウス嗅上皮及びラットの組織では反応が弱く判定不能であった。また、パラフィン切片では反応は全く認められなかった。手技的にはプロテイナーゼK処理及び塩酸処理は必須であり、それらを行わない場合陽性反応は認めなかった。また、ハイブリダイゼーションの時間及び条件としては20時間、37度で最も良好な結果を得られた。15EA03:今後の検討課題は次の4点である。1)嗅細胞の再生時、発生発達時のNGFの発現の有無を観察する。2)パラフィン切片でも観察できるような処理法を検討する。3)NGFRの免疫組織化学との二重染色。4)insitu ハイブリダイゼーションの電子顕微鏡への応用。

Anti-NGFR antibodies were detected by immuno-histochemical technique, olfactory epithelium regeneration NGFR assay, olfactory epithelium regeneration assay and NGF immunocytochemistry. Using the method of "sniffing", "insitu", "NGFcDNA", "sniffing", "NGF", "observe". Use the following words: "NGFcDNA", "pmNGF102", "340bp", "DNA", "pmNGF102". Please use the DNA method to identify the identity of the user and use it. In this book, the mature male and the inferior gland, olfactory bulb, olfactory epithelium and inferior gland are normal. 4% of the fixed liquid is used. The tissues of the inferior gland, olfactory bulb, olfactory epithelium and olfactory bulb could not be detected by histological examination. Cut, slice, slice and slice. In order to improve the quality of the hand, it is necessary to improve the quality of the handcraft. in order to improve the quality of the hand, it is necessary to improve the quality of the technology. The best test results were satisfactory at 37 degrees Celsius over 20 hours under the condition of normal temperature. 15EA03: from now on, the next meeting will be due at 4: 00. The main results are as follows: 1) during the regeneration of the olfactory cells, the NGF cells were detected during the regeneration of the olfactory cells. 2) cut into slices and observe that the method of science is not correct. 3) double staining of NGFR immunocytochemistry. 4) the insitu is not suitable for the use of electronic microphones.

项目成果

T.Miwa etal: "Trasection of the olfactory neives induces expression of nerue grawth factor receptor in mouse olfactory epitheliam" Neuroscience Letters. 155. 96-98 (1993)

T.Miwa 等人：“嗅神经横断诱导小鼠嗅上皮中神经生长因子受体的表达”《神经科学快报》。