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養子免疫療法に用いるLAK細胞の口腔癌組織への集積性に関する研究

口腔癌组织过继性免疫治疗中LAK细胞积累的研究

基本信息

批准号：
05771542
负责人：
森良之
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771542/
关键词：
LAK細胞 IL-2 OK432 細胞走化能扁平上皮癌

项目摘要

口腔癌患者に対する養子免疫療法の治療効果の発現には、細胞障害活性の高い細胞を腫瘍組織に集積させることが重要であると考えられる。今回の研究では、LAK細胞の細胞障害活性および腫瘍集積性を増強させることを目的として、培養初期のOK432の添加、およびCDDPあるいはIFN-gammaで処理された標的腫瘍細胞の培養上清が細胞障害活性および細胞走化能に及ぼす影響について検討した。(方法)手術切除標本の頚部リンパ節を鋏で細切し、ナイロンメッシュ通過後、比重勾配遠心分離で得られた単核細胞層を回収し、リンパ球を分離した。リンパ球の培養は、5%新鮮凍結血漿を含むHyMedium910培養液を使用し、10mug/mlの抗CD3抗体をコーティングしたプレートあるいはフラスコ中で、70OJRU/mlのIL-2存在下で行い、LAK細胞を誘導した。培養初期に0.05KE/mlのOK432を添加し、細胞障害活性および細胞走化能を比較検討した。細胞障害活性の測定は、4時間の^<51>Cr遊離試験法で行い、標的細胞として舌扁平上皮癌由来細胞株であるNAを用いた。細胞走化能は、ケモタキシスチャンバーを使用し、8mumポアサイズのメンブランフィルターを用い、2時間の培養で測定した。細胞走化因子として、IFN-gamma、およびCDDPあるいはIFN-gammaで処理されたNAの培養上清を用いた。培養終了後、フィルター表面に付着している遊走細胞をヘマトキシリン染色液で核染色を行い検鏡した。(結果)OK432の添加培養により、LAK細胞の細胞障害活性の増強が認められ、同時に細胞走化能の増強も認められた。また、腫瘍細胞(NA)培養上清はLAK細胞の細胞走化能を抑制したが、CDDPあるいはIFN-gammaで処理されたNAの培養上清では、その抑制は軽度であり、LAK細胞の走化能が維持されうる可能性が示唆された。

The development of therapeutic effects of immunotherapy for oral cancer patients is important for the accumulation of high cell-barrier activity in tumor tissues. In this study, we investigated the effects of the addition of OK432 and CDDP at the initial stage of culture on the cell inhibition activity and cell aggregation of LAK cells. (Method) After surgical excision of the nucleus, the nucleus was separated from the nucleus by specific gravity matching telecentric separation. The culture medium containing 5% fresh frozen plasma and HyMedium910 was used to induce LAK cells in the presence of 70OJRU/ml IL-2. At the beginning of culture, 0.05KE/ml of OK432 was added, and the cell damage activity and cell transformation ability were compared. Cell damage activity was measured by the 4-hour <51>Cr free assay, and target cells were used in the NA of squamous cell carcinoma derived cells. Cell culture was measured for 2 hours after culture. Cell chemokine, IFN-gamma, CDDP, IFN-gamma, CDDP, CD After the culture, the surface of the cell was stained with a staining solution. (Results) The addition of OK432 to culture medium increased the cytotoxicity of LAK cells, and increased the chemoactivity of LAK cells. CDDP and IFN-gamma treatment of NA culture supernatant inhibited LAK cell chemoactivity, indicating the possibility of maintaining LAK cell chemoactivity.