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ヒト唾液腺におけるサイトメガロウイルス感染性に関する研究

人唾液腺巨细胞病毒感染性的研究

基本信息

批准号：
05771556
负责人：
伊藤千鶴
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05771556/
关键词：
サイメガロウイルス唾液腺末梢血単核球 PCR法免疫組織化学

项目摘要

本研究はPCR(Polymerase Chain Reaction)法の応用により、潜伏状態にあるサイトメガロウイルス(CMV)遺伝子の検出を実現するとともに、その検出方法を用いてCMV潜伏の標的細胞を明らかにした。増幅領域として、CMV株間で比較的変異が少なく、ヒトゲノムあるいは他のヘルペスウイルスと相補性の低いCMV AD169株におけるHindIII断片のb、E、J(それぞれ65K phosphoprotein/pp65、immediate early protein/IE、150K phosphoprotein/pp150を発現)を選択した。各領域において広領域を増幅するプライマーペア-を用いたPrimaryPCR法による増幅産物を鋳型として、その内側に設けたプライマーペア-でNestedPCR法を行った。大半はPrimaryPCR法では陰性であったが、NestedPCR法により陽性所見が出現した検体がみられた。しかし、同一検体でも3領域すべてで同時に陽性あるいは陰性の結果は得られなかったが、このようなPCR産物に対してはDNAシークエンサーを用いた塩基配列の決定を行い、1領域でのみ検出された産物も明らかにCMV遺伝子であることを確認した。その結果、陽性率は唾液腺で28.0%、末梢血単核球で85.2%となり、CMVは他臓器と比較すれば唾液腺に臓器特異性は高いが、末梢血単核球が潜伏の標的細胞であることが証明された。また、CMV特異蛋白の免疫組織学的検索を追加した。以上のことにより、宿主が免疫不全に陥っていない唾液腺では、容易にはCMV特異蛋白の発現は起こらないが、潜伏状態にあるCMV遺伝子は唾液腺に存在しやすい傾向があることが判明し、CMVのレセプターと唾液腺組織との特異的な相互作用が推定され、その解明が今後の課題である。

In this study, the PCR(Polymerase Chain Reaction) method was used to detect CMV latent target cells. In addition, the HindIII fragments b, E, J(including 65K phosphoprotein/pp65, immediate early protein/IE, and 150K phosphoprotein/pp150) of CMV AD169 strain were selected. In each domain, the amplification is performed using the NestedPCR method. Most of the results were negative in the Primary PCR method, and the results were positive in the Nested PCR method. The results of PCR were positive, negative and negative. The positive rate of CMV was 28.0% in salivary glands, 85.2% in peripheral blood lymphocytes, and the specificity of CMV in salivary glands was higher than that in other organs. Immunohistological examination of CMV specific proteins was performed. The above results indicate that the host is immune deficient and salivary glands are prone to CMV specific protein expression, latent state, CMV gene expression in salivary glands, and the specific interaction between CMV and salivary glands is presumed and explained.