サイトメガロウイルス口腔感染症の遺伝子診断法ならびに遺伝子関連療法の開発

巨细胞病毒口腔感染的基因诊断方法和基因相关疗法的开发

• 批准号: 07771946
• 负责人: 伊藤 千鶴
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07771946/
• 关键词: サイトメガロウイルス; nested PCR法; ヒト6型ヘルペスウイルス; ヒト7型ヘルペスウイルス

本研究はnested PCR法の応用により、ヘルペスウイルス科βヘルペス亜科に関するサイトメガロウイルス(CMV)遺伝子の検出を行った。増幅領域として、CMV株間で比較的変異が少なく、ヒトゲノムあるいは他のヘルペスウイルスと相補性の低いCMVAD169株におけるHind III断片のb、E、J(それぞれ65K phosphoprotein/pp65、immediate early protein/IE、150K phosphoprotein/pp150を発現)を選択した。同一検体でも3領域すべてで同時に陽性あるいは陰性の結果は得られなかったが、このようなPCR産物に対してはDNAシークエンサーを用いた塩基配列の決定を行い、1領域でのみ検出された産物も明らかにCMV遺伝子であることを確認した。その結果、陽性率は唾液腺で28.0%、末梢血単核球で85.2%となり、CMVは他臓器と比較すれば唾液腺に臓器特異性は高いが、末梢血単核球が潜伏の標的細胞であることが証明された。一方、検討対照として、6型ヘルペスウイルス(HHV6)、7型ヘルペスウイルス(HHV7)に関してnested PCR法を用いて唾液腺組織93検体を検索した結果、陽性率はそれぞれ69.7%、94.2%となった。また、HHV7は、顎下腺では100%、耳下腺では85.2%、小唾液腺では57.4%検出され、その存在に局在性がある可能性が示唆された。さらに、扁平苔癬をはじめとする口腔粘膜疾患羅患患者と健常者に対し、これらのウイルスの血清抗体価(IgG、IgM)をペア血清にて検討したが、有意な結果は得られなかった。免疫機構の異常がこれらの病変に関与している可能性は高く、ヘルペスイウルス群ウイルスの関与も否定できない。今後、本結果をもととしてさらにその因果関係を解明していく必要がある。

In this study, we investigated the application of nested PCR in detection of CMV gene. The Hind III fragments b, E, J(including 65K phosphoprotein/pp65, immediate early protein/IE, and 150K phosphoprotein/pp150) were selected from CMVAD169 strains. In the same case, the positive and negative results were obtained from the PCR products, and the negative results were confirmed from the PCR products. The positive rate of CMV was 28.0% in salivary glands, 85.2% in peripheral blood lymphocytes, and the specificity of CMV in salivary glands was higher than that in other organs. 93 samples of salivary gland tissues were detected by nested PCR, and the positive rates were 69.7% and 94.2% respectively. HHV7, submandibular gland 100%, auricular gland 85.2%, salivary gland 57.4%, presence of the possibility is not shown. For patients with oral mucosal diseases and healthy individuals, serum antibodies (IgG, IgM) were detected. The possibility of abnormal immune system is high, and the possibility of abnormal immune system is negative. In the future, the cause and effect of this problem will be clarified.