象牙質形成過程におけるストロメライシン様酵素の免疫組織化学的研究
牙本质形成过程中溶基质素样酶的免疫组织化学研究
基本信息
- 批准号:05771645
- 负责人:
- 金额:$ 0.45万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
象牙質形成過程におけるストロメライシン様酵素の局在を調べるためにラットを用いて以下の実験を行った.1.切片作製ウイスター系雄ラット(110g〜160g)の上下顎を固定後,0.5M EDTA溶液で40日間脱灰を行った.その後,マイクロスライサ-を用い15mumの切片を作製した.これらの中で上下顎切歯の根尖部からエナメル質直下の象牙質までが含まれている切片を選択し観察対象とした.2.免疫染色ストロメライシンの抗体にはmouse anti rat stromelysin(transin)IgGを用い,酵素標識抗体法(間接法)を行いDAB発色により抗原抗体反応を光学顕微鏡にて観察した.3.結果象牙質形成期にあたる根尖部から先端部までを観察したが,抗体を用いていないコントロールに比較しストロメライシンの存在を示す様な特異的な染色はいずれの切片においても観察されなかった.4.考察象牙質および象牙前質にはプロテオグリカンが存在することが知られており,それらを分解する活性が象牙質中に存在することを筆者は確認している.また,培養骨細胞上清中からプロテオグリカン分解能を有するプロテアーゼを精製したといった報告もあることから象牙質中のプロテアーゼの局在をプロテオグリカン分解能を持つプロテアーゼの抗体を用い免疫的に検索することは可能であると考えられる.しかし今回,特異的な反応が認められなかった理由として象牙質中のプロテアーゼと使用した抗体との特異性が一致しなかったことが主たる原因と考えられるため,今後はプロテオグリカン分解能を有する種々のプロテアーゼの抗体を用い,局在ならびにプロテアーゼの特性を確認していく予定である.
Dentin formation process in the middle of the enzyme in the middle of the regulation of the use of the following process. 1. Slice preparation of the enzyme in the middle of the male component (110g ~ 160g) of the upper and lower jaw after fixation, 0.5M EDTA solution for 40 days to remove ash. After that, we used 15mum slices to make it. 2. Immunostaining of the upper and lower mandibular incisors with antibodies to mouse anti rat stromelysin(transin)IgG Enzyme identification antibody method (indirect method), DAB color detection, antigen antibody reaction, optical microscope detection. 3. Results dentin formation period, root tip, tip detection. 4. Examination of dentin and ivory precursor, detection of the presence of active dentin, detection of active dentin, detection of active dentin. In the supernatant of cultured bone cells, there is a possibility of purification of the protein in the dentin. The reason for the specific reaction is to confirm the specificity of the antibody in the dentin.
项目成果
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