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インターロイキン3活性抑制因子の精製

IL-3活性抑制剂的纯化

基本信息

批准号：
05780455
负责人：
杉本健吉
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780455/
关键词：
インターロイキン3活性抑制因子

项目摘要

今年度の実施結果1.大量サンプルの精製に先だって少量のサンプルより精製ステップの検討を行い、硫安分画、疎水クロマトグラフ、陰イオンクロマトグラフ(1)、陽イオンクロマトグラフ、までの精製ステップを確立した。2.次に陰イオンクロマトグラフ(2)で得られたいくつかの分画を更にゲル濾過クロマトグラフにかけてメジャーピークを単離したが、この段階でNIL-3活性は分散してしまった。この段階の幾つかのサンプルについてアミノ酸配列を決定したところ、プレアルブミンであることが判明した。3.そこでプレアルブミンのNIL-3活性について検討したが、プレアルブミンにNIL-3活性は検出できなかった。但し、マウスのプレアルブミンは市販品が存在しない為、ヒトのプレアルブミンを使用した。4.最終段階にまで精製を進めるため、NIL-3の精製源を約10リットル集めた。今後の展開に関する計画1.陰イオンクロマトグラフ(2)の段階で活性分画が分散してしまったので、メジャーピークとして活性分画を得るための条件を再検討する。この条件検討の為に、ある程度のサンプル量を準備中である。2.今回の予備精製で、最終段階近くまでプレアルブミンがメジャーピーク中に混ざってくることが判明したので、プレアルブミン除去の方法を検討する。3.マウスのプレアルブミンについてもNIL-3活性を検討する必要がある。4.最終段階までの精製めどがついたところで、サンプル取得時に得られた細胞よりライブラリーを構築する準備を進める。

This year's implementation results 1. A large number of samples were refined, and a small amount of samples were first separated. The process of refining the sample was carried out in the middle of the process, and the sulfur, water, and cathode were selected.(1) The positive and cathode were selected, and the refined sample was established. 2. NIL-3 activity is dispersed in this phase. The number of stages in the process is determined by the acid allocation. 3. The activity of NIL-3 was detected by the enzyme. However, it is not necessary to use the product in the market. 4. The final stage is refined, and the refined source of NIL-3 is about 10 minutes. 1. The conditions under which the active components are distributed and obtained are discussed again. This condition is discussed in detail. 2. This paper discusses the method of preparation and final stage removal. 3. NIL-3 activity is necessary for the study of NIL-3 activity. 4. The final stage is refined, and the cells are prepared when they are acquired.