キメラマウスを用いた中枢神経系・細胞系譜の解析
使用嵌合小鼠分析中枢神经系统和细胞谱系
基本信息
- 批准号:05780572
- 负责人:
- 金额:$ 0.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
- 财政年份:1993
- 资助国家:日本
- 起止时间:1993 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
(1)C3H系統とBALB/c系統のキメラマウスを作成し、その胎生期及び生後の神経系組織におけるキメリズムをC3H系統特異的抗原(CSA)に対する抗体で免疫染色することによってC3H系統由来細胞の分布の観点から調べた。その結果、発生期大脳皮質のマトリックス細胞層ではCSA陽性細胞が脳室に対して垂直なカラム状の集団を形成していた。移動層、cortical plateにおいてはこれらマトリックス細胞層に存在するカラムの延長線上にCSA陽性細胞が配列している例と移動層で分岐している例の両方が観察された。cortical plateにおけるCSA陽性神経細胞は、マトリックス細胞層で見られた様な明瞭な集団を形成していなかった。さらに、生後のキメラマウス大脳皮質においては、CSA陽性細胞と陰性細胞がカラム状に配列していなかった。以上の観察所見を総合すると、クローナルなマトリックス細胞集団から生み出された神経細胞は常に脳室面に垂直な方向に移動するとは限らず、水平方向の移動を経て大脳皮質の異なる領域に移動する場合のある事が示唆された。(2)C3HとBALB/cの胎生14日の終細胞より細胞を解離・混合して培養皿にまき、経時的に固定して観察した。培養1日目から直径50から数百ミクロンの細胞集塊の形成が観察された。これら細胞塊をMAP2に対する抗体(神経細胞のマーカー)とGFAPに対する抗体(グリア細胞のマーカー)により免疫染色して、共焦点レーザー顕微鏡により観察したところ、表層にMAP2陽性細胞、中心および内層にGFAP陽性細胞が分布していた。以上の結果からこの培養系では、生体内における細胞系譜、分化段階、空間的配置を反映して細胞の再凝集がおこること、特にグリア細胞におけるGFAPの発現促進がおこることが示された。
(1) C3H system and BALB/C system are related to the development, prenatal and postnatal nervous system tissues, and C3H system specific antigen (CSA) is associated with antibodies to immunostaining. As a result, the CSA-positive cells in the cortex of the brain were formed into a vertical cluster in the development stage. Moving layer, cortical plate, etc. CSA positive cells are arranged on the wiring board of the mobile layer and the cortical plate. Cortical plate CSA-positive neurons are seen in the cell layer, and the formation of clusters is evident. In addition, after birth, CSA-positive cells and CSA-negative cells are arranged in the cortex of the brain. The above observations show that the cells in the brain are moving vertically in the normal direction, horizontally in the normal direction, and horizontally in the different regions of the brain. (2) C3H and BALB/c terminal cells on day 14 of birth were observed for cell dissociation, mixing, and fixation in culture dishes. The formation of cell aggregates from 50 to hundreds of cells in diameter was observed on day 1 of culture. MAP2-positive cells in the surface layer, GFAP-positive cells in the center layer and GFAP-positive cells in the inner layer were observed by immunostaining and confocal microscopy. These results indicate that the cell lineage, differentiation stage, and spatial disposition in the culture system reflect the reaggregation of the cells and the promotion of GFAP production in the culture system.
项目成果
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