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テネイシン欠損環境における神経系ミュータント遺伝子の発現

腱蛋白缺乏环境中神经系统突变基因的表达

基本信息

批准号：
07780761
负责人：
吉木淳
金额：
$ 0.58万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780761/
关键词：
リーラーマウスキメラマウステネイシンコンジェニック系統

项目摘要

1 テネイシン欠損リーラーマウスの作製テネイシン欠損コンジェニック系統であるBALB/cA-TN-/-の雌と同じバックグラントを持つBALB/cA-rl/+の雄を交配した。このBALB/cA-rl/+のreeler遺伝子はOrleans reelerでゲノム遺伝子にLINE1配列の挿入があるために起こった変異であることが判明したのでPCRにより識別した。得られたF1個体からrl/+の遺伝子型をもつBALB/cA-TN+/-,rl/+をPCRにより選別して、現在、F1同士の交配をおこなっている段階である。tenascin遺伝子は第4染色体、reeler遺伝子は第5染色体に位置しているので、それぞれ独立に分離することが期待される。今後、F2が得られた段階でPCRによって9種類の遺伝子型を識別し、BALB/cA-TN-/-,rl/+個体を選んでテネイシン欠損リーラー系統として確立する予定である。2 キメラマウスによる解析まず、テネイシン欠損コンジェニック系統であるGRS/A-TN-/-と正常系統であるC3Hとの間でキメラマウスを作製して、テネイシン蛋白の分布を解析した。プローブは自家製のテネイシンに対する単抗体3-6を用いた。その結果、小脳におけるテネイシンの分布は分子層に見られ、正常系統由来のベルグマングリアの突起の分布に対応した縞状模様として観察された。一方、テネイシンRNAプローブを用いたin situ hydrizidationによって小脳におけるテネイシン発現細胞がベルグマングリアであることが示された。これらの結果から、小脳におけるテネイシンはベルグマングリアが産生しており、細胞外に分泌されたテネイシン蛋白は産生細胞自身の周囲にあって広く拡散しないことがわかった。現在、リーラーとテネイシン欠損マウスのキメラを作製中である。

1. The system of BALB/cA-TN-/-female and male mating. The BALB/cA-rl/+ reeler gene is an Orange reeler gene. It can be identified by PCR. F1 individuals were identified by PCR from BALB/cA-TN+/-,rl/+, and F1 individuals were mated at different stages. Tenascin gene is located on chromosome 4 and reeler gene is located on chromosome 5. In the future, 9 types of genetic subtypes will be identified by PCR at the F2 level, and the BALB/cA-TN-/-,rl/+ individuals will be selected for identification and identification of genetic deficiencies. 2. Analysis of the distribution of protein in the GRS/A-TN-/-and normal systems. The antibody 3-6 was used in the production of the virus. The distribution of small and small molecules is observed at the molecular level, and the distribution of small and small molecules is observed at the molecular level. The RNA gene is used in situ hydrolysis to produce a protein that can be used as a protein. The result is that the cells are secreted outside the cell and the cells themselves are secreted outside the cell. Now, it's time to start working.