興奮性および抑制性神経伝達物質受容体の相互作用の分子薬理学的解析

兴奋性和抑制性神经递质受体相互作用的分子药理学分析

• 批准号: 05780582
• 负责人: 廣内 雅明
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780582/
• 关键词: GABA_B受容体; 機能発現; 精製; 分子多様性

アフリカツメガエルの卵母細胞にGABA_B受容体の機能発現を試みた。マウス全脳より得られたmRNAを卵母細胞中に注入した場合、GABA_B受容体の機能発現を電気生理学的に確認することができた。そこで次に、このmRNAよりcDNAライブラリーを作製し、in vitroでRNAを合成したものの発現を試みた。発現の指標として電気生理学的な方法を用いたスクリーニングを行った場合、よい結果がなかなか得られなかった。[^3H」GABA結合を測定することでも同定を試みたが、卵母細胞に特異的な[^3H]GABA結合は認られるものの、GABA_B受容体への特異的な結合を見いだすのは困難であった。一方、脳内GABA_B受容体を同定するために、その精製を試みた。GABA_B受容体作動薬であるバクロフェンを用いたリガンドアフィニティーゲルを作製し、ウシ大脳皮質中のGABA_B受容体を単離した。この標品を、すでに得ているGABA_B受容体の特異的なモノクロナル抗体を用いて解析した。その結果、分子量約8万の主要な蛋白質の存在を確認できた。さらに、この蛋白質の前後に抗体と反応する分子の存在が認られ、少なくともGABA_B受容体には2種類以上の分子種が存在するものと思われる。GABA_B受容体にはオートレセプターとヘテロレセプターの2種類が認られるという電気生理学的検討結果、あるいは受容体作動薬や拮抗薬を用いた時の反応性の違いなどからサブタイプの存在を主張する意見もある。これらの報告は今回の結果を支持するものであり、神経間の相互作用を考える上で、またGABA_B受容体の機能的役割を解析する場合のサブタイプに対する考慮が重要な問題となることが考えられる。

The functional development of GABA_B receptor in oocytes was studied. The expression of GABA_B receptor mRNA in oocytes was confirmed by electrophysiology. This is the first time that we have tried to control the expression of mRNA in vitro. The method of electrophysiology is used to detect the index and the result is obtained. [^3H] GABA binding assay is difficult to determine, oocyte-specific,[^3H]GABA binding assay is difficult to determine, and GABA_B receptor specific binding assay is difficult to determine. The GABA_B receptor in a square and a square is determined simultaneously, and the GABA_B receptor in a square and a square is refined. GABA_B receptor activation is controlled by the GABA_B receptor in the cortex. This standard was used to analyze the specific GABA_B receptor. As a result, the existence of a major protein with a molecular weight of approximately 80,000 was confirmed. There are more than two kinds of molecules in the GABA receptor. The results of the electrophysiological study of GABA_B receptor and its two kinds of receptors are discussed, and the opinions on the existence of GABA_B receptor and its antagonist are proposed. This report supports the results of this review. The interaction between brain and brain is examined. The function of GABA_B receptor is analyzed. The important problem is considered.