神経細胞におけるGAP-43の機能の解明

阐明 GAP-43 在神经元中的功能

基本信息

批准号：
05780612
负责人：
古川勝敏
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780612/
关键词：
neuron GAP-43 PC12 development patch-clamp

项目摘要

神経細胞の分化のメカニズムを解明するために、視神経細胞のモデルとして近年多くしようされているPC12細胞を用い、それらの細胞をnerve growht factor(NGF)または、cAMPの膜透過性化合物である8-bwomo-cAMPの存在下に培養した。それらの処置により、PC12細胞に膜電位依存性ナトリウムチャンネル、カルシウムチャンネルさらにはセロトニン受容体が発現されることを認めた。これらのチャンネル、受容体の特性を電気生理学的に解析したところ、カルシウムチャンネルにおいてはomega-コノトキシン感受性チャンネルが多く発現され、セロトニン受容体はタイプ3受容体であることが明らかになった。さらに我々はPC12細胞をフォスフォジエステレース阻害剤であるrolipram存在下に培養したところNGFと同様なチャンネル、受容体の発現作用を有しているを示した。またNGF存在下に培養を続けたPC12細胞を、その後NGFを取り除いた条件下で培養し続けるとomega-コノトキシン感受性カルシウムチャンネルが選択的に脱落することが明らかになった。現在これらPC12細胞に認められた神経細胞分化の現像が哺乳動物の中枢神経細胞においても起こることであるか調べるために、ラット海馬の神経細胞を培養しこれらにNGF等の成長因子を投与して実験を行っている。またこれらの細胞分化においてGAP-43がどのような役割を果しているか検討するために、この蛋白質に対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを用いて実験中である。

为了阐明神经元分化的机制，近年来已用作视神经元的模型的PC12细胞在神经生长因子（NGF）或8-bwomo-camp的存在下培养，这是一种可渗透的cAMP膜化合物。据观察，这些治疗使PC12细胞表达膜电压依赖性钠通道，钙通道甚至5-羟色胺受体。对这些通道和受体的性质的电生理分析表明，欧米茄毒素敏感的通道在钙通道中表达，5-羟色胺受体是3型受体。此外，当PC12细胞在Rolipram（一种磷酸酯酶抑制剂）的存在下培养时，它表明它们具有与NGF相同的通道和受体表达效应。还表明，当在去除NGF的条件下培养在NGF存在下培养的PC12细胞时，选择性地脱落了omega-conotoxin敏感的钙通道。为了研究在这些PC12细胞中观察到的神经元分化是否发生在哺乳动物中枢神经细胞中，正在通过培养大鼠海马的神经元并将NGF等生长因子（如这些神经元）施用来进行实验。此外，为了研究GAP-43在这些细胞分化中的作用，我们目前正在使用反义寡核苷酸进行该蛋白进行实验。