藻類の葉緑体核様体の高次構造構築に働く凝縮因子の研究

藻类叶绿体核高阶结构构建的凝聚因子研究

• 批准号: 05740493
• 负责人: 宮村 新一
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05740493/
• 关键词: 葉緑体核様体; 藻類; ピレノイド; Rubisco; 葉緑体DNA

藻類は、多種多様な形態の葉緑体を持つのみならず、その遺伝子発現の場である葉緑体核様体の形状も、微小な核様体が葉緑体全体に分散するものやピレノイドが核様体であるものなど著しい多様性を示す。しかしながら、藻類の葉緑体核様体の高次構造については未知の点が多い。我々は、藻類の葉緑体核様体の高次構造を明かにするためにフサイワヅタから葉緑体核様体を単離し、その性質について調べた。フサイワヅタは、葉緑体核様体がピレノイドに局在し、ピレノイドと複合体を形成している特異的な性質を持っている。これまで、フサイワヅタについては、ピレノイド核様体複合体が主としてリブロース-1,5-二リン酸カルボキシラーゼ/オキシゲナーゼ(Rubisco)の大小のサブユニットと44KDaと63KDaのタンパク質から構成されていることが分かった。しかし、ピレノイド核様体複合体はこれまでの単離条件ではきわめて不安定であり、単離過程でいくつかのタンパク質が失われた可能性がある。そこで、ピレノイドを安定化することが知られているHgCl_2処理を行ったあとでピレノイド核様体複合体の単離を行った。その結果、ピレノイド核様体複合体は安定化されて単離され、単離ピレノイド核様体複合体のピレノイド基質全体にDNAとRubiscoが分布しているのかDNA特異的蛍光色素DAPI染色法と抗Rubisco抗体を用いた蛍光抗体法によって確かめられた。このピレノイド核様体複合体はSDS-PAGEの結果、主要タンパク質のほかに少なくとも約23種の微量タンパク質によって構成されていることが明かとなった。今年度は、関東地方の海水の水温が低いためか、フサイワヅタなどの生育が悪く、これ以上の実験を進めることができなかった。

Algae contain a variety of chloroplasts in various forms, and the shape of the chloroplast nucleus can be seen in the field where genetic materials are produced. The obvious diversity of the small chloroplast nuclei scattered throughout the chloroplast is demonstrated by the two small nuclear bodies. There are many unknown points in the high-order structure of chloroplast nuclei of algae. The high-order structure of chloroplast nuclei in algae is clearly characterized by the separation and properties of chloroplast nuclei. The chloroplast nucleus forms a complex with unique properties. The structure of the complex is composed of the following components: Rubisco, Rubisco The nuclear complex is unstable due to the separation condition and the possibility of losing quality due to the separation process. For example, if you want to know more about HgCl_2, you can use it. The results showed that the DNA and Rubisco distribution in the whole matrix of the nuclear complex was stabilized by DAPI staining and the anti-Rubisco antibody was confirmed by DAPI staining. The results of SDS-PAGE showed that there were about 23 kinds of protein in the nuclear complex. This year, the temperature of the sea water in Kanto is low, and the fertility is high.