培養心筋を用いた心保存液の組成及び効果の研究

培养心肌保存液的成分及作用研究

• 批准号: 05857132
• 负责人: 深沢 学
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05857132/
• 关键词: 培養心筋細胞; 低温保存; 心保存液; 低温障害

研究目的:心保存における保存液の電解質組成、緩衝液、浸透圧の培養心筋細胞に与える影響について検討する。研究方法:新生仔ラットの心室筋を用い、コラゲナーゼを使用し、心筋細胞を単離する。単離心筋細胞をMCDB-107培地を使用し4日間培養し、培養心筋シートを作成する。この細胞シートを保存用検体として用い、各種電解質組成液(細胞内液型、中間型、細胞外液型)、各種緩衝液(燐酸緩衝液、重炭酸緩衝液、HEPES緩衝液)、各種浸透圧の保存液を用い、低温保存し、心筋細胞機能、心筋細胞形態、細胞膜安定化に与える影響を検討する。研究結果:1)電解質組成:未熟心筋の低温保存に於いては、従来より報告されている結果とは異なり(細胞内液型が優れているといわれていた)、細胞外液型組成を有する保存液(乳酸加リンゲル液、MCDB-107培地等)が細胞機能保持、細胞膜安定化という点で優れていた。2)緩衝液:燐酸緩衝液及び重炭酸緩衝液は、低温環境下の未熟心筋に対し、細胞障害性(細胞機能障害及び細胞膜障害)に作用したのに対し、HEPES緩衝液は細胞保護的に作用した。保存液に用いる緩衝剤としては、HEPES緩衝剤が有用と考えられた。3)浸透圧:主に血清を用いてこう質浸透圧について検討したが、10%以上の濃度では細胞障害がみられ至適濃度は2%前後の低濃度であった。また無血清の状態でも十分保存可能であった。未熟心筋の低温保存に際しては、膠質浸透圧の維持は重要な問題ではないと考えられた。

Research purpose: The electrolyte composition, buffer, and infiltration pressure of the cardiac preservation solution and the influence of cultured cardiac cells on cardiac preservation. Research methods: Use of neonatal ventricular muscles, use of cardiac muscle cells, and separation of cardiac muscle cells. Single centrifuged muscle cells, MCDB-107, were prepared using the 4-day culture system and the cultured muscle system. Various electrolyte composition solutions (intracellular solution type, intermediate type, extracellular solution type), various buffer solutions (alkaline acid buffer, bicarbonate buffer) for storage of cells and cells solution, HEPES buffer), various soaking pressures and preservation solutions, use of cryopreservation, cardiac cell function, cardiac cell morphology, cell membrane stabilization and its effects. Research results: 1) Electrolyte composition: Low-temperature preservation of immature heart muscle by に于いては, 従来より report されているRESULTS とはisoなり (intracellular liquid type が优れているといわれていた), the extracellular liquid type consists of a preservation solution (lactic acid plus リンゲル solution, MCDB-107 Pedi, etc.), which maintains cell functions, stabilizes cell membranes, and is an excellent solution. 2) Buffers: dioic acid buffer and bicarbonate buffer, the effects of immature heart muscles under low temperature environment, the effects of cell damage (cell dysfunction and cell membrane damage), and the effects of HEPES buffer on cell protection. Preservation solutions are available in HEPES buffered buffers and HEPES buffered buffers. 3) Penetration pressure: Mainly use serum to soak the pressure with serum, the concentration of 10% or more and the cell damage pressure to the appropriate concentration of 2% or so, and the low concentration of pressure. The serum-free state means that it is very possible to preserve it. The problem of low-temperature preservation of immature heart muscle and the maintenance of colloid permeability pressure are important issues.

项目成果

Hiroyuki Orita,et al.: "Cardiac myocyte functional and biochemical changes after hypothermic preservation in vitro." Jornal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 107. 226-232 (1994)

Hiroyuki Orita 等人：“体外低温保存后心肌细胞功能和生化的变化。”