発作性夜間血色素尿症における血小板膜糖蛋白質糖鎖異常の解析

阵发性睡眠性血红蛋白尿症血小板膜糖蛋白糖链异常分析

• 批准号: 06770847
• 负责人: 川口 辰哉
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770847/
• 关键词: 発作性夜間血色素尿症; 血栓症; 溶血性貧血; 複合糖質; 血小板

発作性夜間血色素尿症(PNH)の異常溶血に関連し、我々はグリセロ糖脂質であるGPIアンカーやスフィンゴ糖脂質であるガングリオシドなどの膜糖脂質発現異常を明らかにしてきた。いずれも糖転移異常による糖鎖合成不全がその分子基盤を形成しており、PNH膜異常を広く膜複合糖質発現と捉えうると考えられた。そこで残された主要膜複合糖質である糖蛋白質糖鎖の発現異常を検討する必要がある。本研究は、致死的合併症である血栓症とも関連して、血小板膜糖蛋白質糖鎖の発現異常をレクチン結合性の違いにより検出することを目的とした。対象:PNH5症例を対象とした。フローサイトメトリーにより全症例に20〜98%の異常血小板が検出された。レクチン結合性の比較検討:血小板膜画分を遠心分離後、界面活性剤にて可溶化し膜蛋白抽出液とした。マンノース結合性のレンチルレクチン(LCA)、コンカナバリン(ConA)、ガラクトース結合性のヒママメレクチン(RCA120)、N-アセチルグルコサミン結合性の小麦胚芽レクチン(WGA)の4種類のレクチンを用いた。各レクチンビーズと膜蛋白抽出液とを反応させ、レクチン結合膜蛋白を分離しSDS-PAGEで解析した。その結果、WGAレクチン結合性では、健常人で反応しPNH全症例で反応性に乏しい約40KDaの蛋白質を見いだした。一方、LCA,ConA,RCA120レクチンへの結合性には明らかな差は認めなかった。40KDaの膜蛋白は既知膜糖蛋白の分子量と異なり、また抗GPIIb/IIIa抗体や抗GPIb抗体とも反応しないことから、未知糖蛋白の可能性が考えられた。以上より、GPIアンカー(グリセロ糖脂質)やガングリオシド(スフィンゴ糖脂質)に加えて膜糖蛋白糖鎖の発現異常が認められ、PNHを血球膜複合糖質発現異常症として捉えうることが示された。現在、40kDa蛋白の精製、構造解析を進めている。

The patients with nocturnal hemoglobinuria (PNH) often have hemolysis, and we use glycolipid, GPI, glycolipid, glycolipid, membrane glycolipid, glycolipid and glycolipid. The synthesis of sugar is not complete, the molecular base is formed, and the PNH membrane is used to synthesize the sugar. The main membrane complex is glycoprotein, glycoprotein and glycoprotein. In this study, fatal complication, thrombosis, platelet membrane glycoprotein, platelet membrane glycoprotein and platelet membrane glycoprotein were detected. Elephant: a case of PNH5's disease. I don't know. I don't know what to do. After the platelet membrane was drawn and separated, the interfacial activity was dissolved and the extraction solution of membrane protein was purified. The combination of wheat germ spores and spores (LCA), the combination of wheat germ spores (WGA), the use of wheat germ spores (WGA), and the use of wheat germ spores (WGA). The membrane protein extract was isolated from the membrane protein extract, and the membrane protein was separated from SDS-PAGE. The results showed that the results of WGA test, the combination of PNH and normal people, the case of reversal deficiency, and the expression of protein in 40KDa. On the other hand, the combination of the LCA,ConA,RCA120 information system indicates that there is a difference between the two parties. 40KDa "membrane protein" known membrane glycoprotein "molecular weight", "anti-GPIIb/IIIa antibody"anti-GPIb antibody", "anti-glycoprotein", "unknown glycoprotein" possibility. The above drugs, GPI glycoproteins, glycolipids, glycoproteins, glycoproteins, At present, 40kDa protein purification, analysis and analysis are in progress.

项目成果

Norihiro Iwamono,et al.: "Markedly high population of affected reticulocytes negative for decay-accelerating factor and CD59 in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria" Blood. 84. 3925-3928 (1994)

Norihiro Iwamono 等人：“在阵发性睡眠性血红蛋白尿症中，受影响的网织红细胞数量明显增多，对腐烂加速因子和 CD59 呈阴性”血液。

Hideki Nakakuma,et al.: "Persistence of affected T lymphocytes in long-term clinical remission in paroxysmal nocturnal hemoglobinuria" Blood. 85 (in press). (1995)

Hideki Nakakuma 等人：“阵发性睡眠性血红蛋白尿症长期临床缓解中受影响的 T 淋巴细胞的持久性”血液。