悪性脳腫瘍における薬剤耐性遺伝子に対する分子生物学的解析と臨床への応用

まずわれわれは脳腫瘍、特に悪性脳腫瘍においてどのぐらいの頻度でMDR1が発現しているかをPCRを用いて遺伝子レベル(mRNA,DNA)にて解析致しました。方法は腫瘍細胞よりtotalRNA,DNAを抽出し、PCRを用いてMDR1の一部を増幅、アガロース電気影動を行った後、エチジンブロマイドにて染色、UVライト上にて発現の有無を観察しました。グリオーマにおけるMDR1mRNA発現の結果は、low grade glioma10例中8例 80%、anaplastic glioma 11例中8例 73%、glioblastoma30例中22例 73%、glioblastoma cell line6例中0と今回の調査によりMDR1の発現率はgliomaの悪性度に関係しないことがわかりました。ついでDNAレベルでのMDR1の発現状態では、すべての症例において発現が認められました。約75%のgliomaにおいて、悪性度に関係なく多剤耐性遺伝子(MDR1)のmRNAレベルでの発現が確認され、またDNAレベルでの発現がmRNAの発現を認めなかった14症例においても確認されたことは、MDR1のmRNAレベルでの発現の制御がプロモーター、エンハンサーにおいて制御されていると考えられ、我々臨床医がよく経験する徐々に化学療法が効かなくなる一つの説明になると考えられた。

まずわれわれは脳腫瘍、特に悪性脳腫瘍においてどのぐらいの頻度でMDR1が発現しているかをPCRを用いて遺伝子レベル(mRNA,DNA)にて解析致しました。方法は腫瘍細胞よりtotalRNA,DNAを抽出し、PCRを用いてMDR1の一部を増幅、アガロース電気影動を行った後、エチジンブロマイドにて染色、UVライト上にて発現の有無を観察しました。グリオーマにおけるMDR1mRNA発現の結果は、low grade glioma10例中8例 80%、anaplastic glioma 11例中8例 73%、glioblastoma30例中22例 73%、glioblastoma cell line6例中0と今回の調査によりMDR1の発現率はgliomaの悪性度に関係しないことがわかりました。ついでDNAレベルでのMDR1の発現状態では、すべての症例において発現が認められました。約75%のgliomaにおいて、悪性度に関係なく多剤耐性遺伝子(MDR1)のmRNAレベルでの発現が確認され、またDNAレベルでの発現がmRNAの発現を認めなかった14症例においても確認されたことは、MDR1のmRNAレベルでの発現の制御がプロモーター、エンハンサーにおいて制御されていると考えられ、我々臨床医がよく経験する徐々に化学療法が効かなくなる一つの説明になると考えられた。