発光分析法を用いた精子内ATPの定量法の確立

荧光光谱法定量精子中 ATP 的方法的建立

• 批准号: 06771258
• 负责人: 石原 哲
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771258/
• 关键词: 精子; ヒト精子; ATP; 発光分析

1.精子の活性度をATP量をもって測定する場合、ATPの抽出操作までと抽出操作中の損失が第一の課題となったが、以下の点が判明した。(1)射精後の時間経過による変動が大きかった。これは発現時間とその後の推移から考えて単にATP量の自然な減少のみではなく、射精後の精液の液化現象も関連していると思われ、追加検討が必要であると思われた。(2)希釈操作による影響は回収率から検討した結果、特に認められなかった。(3)抽出方法は化学的に行なう方法を用いたが、抽出時間などの影響は少なく、特に技術的な問題がなかった。(4)最終的にATP量をルシフェリン=ルシフェラーゼ系発光分析で定量する時点で、イオン強度が高い場合などでは発光が阻害されるため、検体を採取してから精漿などを除去する洗浄操作を加える必要性が示唆された。(5)(4)以外の点では最終的な定量法に特に問題はなかった。2.通常の凍結・解凍を行なった場合、ATPが大量に消費されるためか、活性は一割程度となった。緩衝液等の検討でこれを防止することを試みたが、満足な結果が得られなかった。ATP自身は凍結・解凍を行なっても良好に保存されることが確認された。このため、完全にATPを抽出して凍結保存できる方法のうち、臨床の現場で容易に実施できる方法を求めて継続検討中である。

1. When sperm activity and ATP amount are measured, the first issue is the extraction operation of ATP and the loss during extraction operation. The following points are clearly understood. (1) The time after ejaculation has passed and the time has passed.これは発 appear time とその后のelapsing から考えて単にATP amount naturally な decrease のみではなく, The phenomenon of liquefaction of semen after ejaculation is related to the phenomenon of liquefaction of semen, and it is necessary to add 検がであると思われた. (2) It is expected that the recovery rate will not be affected by the operation, and the results and special characteristics will be the same. (3) Extract the use of chemical methods, the effects of time, and the problems of special techniques. (4) The final amount of にATP をルシフェリン=ルシフェラーゼ is the quantitative time point of optical analysis and the case where the イオン intensity is highなどでは発光が hinders されるため, 検体をadopts してからsemen pulp などを removes するwashing operation をadds えるnecessity がshows instructing された. (5) Points other than (4) are the final problem of the quantitative method. 2. Normally, when freezing and thawing are done, a large amount of ATP is consumed, and the activity is reduced to a certain degree. Buffer etc. の検褜でこれを prevents することをtrial みたが, 満足な results がget られなかった. ATP itself is frozen and unfrozen, and it is good and good, and it is stored and confirmed.このため, completely にATP を extracted し て frozen preservation で き る method の う ち, clinical の on-site で EASY に 実 で き る method を request め て継続検 Discussion in で あ る.