卵巣におけるGnRH様物質の遺伝子発現とその調節機構について

卵巢GnRH类物质基因表达及其调控机制

• 批准号: 06771351
• 负责人: 遠藤 方哉
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771351/
• 关键词: GnRH遺伝子発現; イントロンA

[目的]卵巣にGnRH の存在することは知られているが、その遺伝子発現など詳細はいまだ不明である。今回我々はRT-PCR法、5´RACE-PCR法、North-ern Blot法、によりGnRHの遺伝子発現およびその調節を検討した。[方法]8週齢ラット卵巣からtotal RNAを調整し、DNaseにて処置後、イントロンA〜エクソンIVまでの種々プライマーを用いてRT-PCRを施行した。また5´RACE-PCR法により転写開始点の同定を行った。次に4週齢ラットを対照群、PMSG刺激群、PMSG-HCG刺激群の3群に分類、Northern Blot法によりGnRH mRNAの発現とその変化を検討した。[成績]RT-PCR法により視床下部typeのものとイントロンAを含むGnRH mRNAを検出した。これらのPCR productはDirect Sequence法により塩基配列を確認した。さらに5´RACE-PCR法により卵巣におけるGnRHmRNAの転写開始点が、視床下部typeのpromotorの他にイントロンAにも存在することが示唆された。次にNorthern Blot法では視床下部typeのプローブを用いた場合、GT1-7細胞で約600bpのバンドを検出したが卵巣では約4kb,6kbのバンドを認めた。さらにイントロンAを規定するプローブを用いてre-probeしたところ、卵巣ではより強く約4kb,6kbにバンドを認めた。しかしGT1-7細胞ではシグナルは検出されなかった。またこれらのバンドはPMSGさらにHCG投与により発現量の増加がみられた。[結論]ラット卵巣においてGnRH mRNAは視床下部のそれとは異なる長さのものも存在し、この違いはイントロンAを含んでいると考えられた。そしてこれは、卵巣では視床下部のそれとは異なるpromotorが存在することが示唆された。これらはPMSG-HCGにより調節を受けており生体内での作用を有すること考えられる。

[Purpose] The existence of the ovary GnRH is unknown and the details are unknown. This time I will use the RT-PCR method, the 5´RACE-PCR method, the Northern-ern Blot method, and the GnRH method. [Method] 8 weeks of total After RNA adjustment and DNase treatment, RT-PCR was performed using RT-PCR.また5´RACE-PCR methodにより転write the starting pointの同定を行った. The 3-group classification of the 4-week にラットを対対 group, the PMSG stimulation group, and the PMSG-HCG stimulation group was performed, and the Northern Blot method was used to perform the GnRH mRNA transformation. [Results] RT-PCR method is based on the lower part of the bed type のものとイントロンAをcontaining GnRH mRNAを検出した. The PCR product and Direct Sequence method have been confirmed by the base alignment method.さらに5´RACE-PCR method により Egg 巣におけるGnRHmRNAの転Writing start pointが、View The lower part of the bed type のpromotor のhis にイントロンA にも presence することが Show instigation された. Northern The Blot method is suitable for use in the lower part of the bed type, and it is not applicable to GT1-7 cells. 600bp のバンドを検出したが egg巣では is about 4kb, 6kb のバンドを知めた.さらにイントロンAを Regulations するプローブを用いてre-probeしたところ、 egg巣ではより强くapproximately 4kb, 6kb にバンドを知めた.しかしGT1-7 cells ではシグナルは検出されなかった.またこれらのバンドはPMSGさらにHCG invests in により発真人のincrease plus がみられた. [Conclusion] ラットOVAO巣においてGnRH The presence of mRNA in the lower part of the bed is the presence of the disease and the presence of the disease in the lower part of the bed.そしてこれは, egg 巣では看under the bed, のそれとは, different なるpromotor が presence, することが说唆された. PMSG-HCG regulates the function of PMSG-HCG in vivo and regulates it.

项目成果

遠藤 方哉: "卵巣におけるGnRHの遺伝子発現とその調節" 日本産婦人科学会誌. 47. 281- (1995)

Hoya Endo：“GnRH基因在卵巢中的表达及其调节”日本妇产科学会杂志47。281-（1995）。

植村次雄.遠藤方哉: "GnRHの卵巣への直接作用" HORMONE FRONTIER IN GYNECOLOGY. 1. 53-60 (1994)

Tsuguo Uemura. Masaya Endo：“GnRH 对卵巢的直接作用”《妇科激素前沿》1. 53-60 (1994)。