咬筋をモデルとした筋ジストロフィーの薬理学的研究:Ca^<2+>挙動との連携

以咬肌为模型的肌营养不良药理学研究：与Ca^<2+>行为的配合

• 批准号: 06771647
• 负责人: 高橋 俊介
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771647/
• 关键词: bupivacaine; 筋小胞体(SR); 筋形質膜(SL); 咬筋; Calcium

細胞内Ca過剰蓄積による咬筋細胞の障害メカニズムをその膜系機能に対する効果から明らかにすることを目的とした。ニュージーランド白色家兎(2-2.5kg)の右則の咬筋に1%bupivacaineを,対照として左側咬筋に0・9% salineをそれぞれ投与し,1,3,5そして10日後に摘出した左右咬筋から筋小胞体(SR)と筋形質膜(SL)をそれぞれ分離した。1.oxalate存在下,SRのCa uptake velocity とCa-ATPase活性を測定した場合:coupling ratioはbupivacaine投与3日後に著明に低下した。2.oxalate非存在下,bupivacaine投与3日後に調製分離したSRでは:(1)定常状態Ca uptakeとCa permeabilityが低下した。(2)これらの低下は,verapamil(0.125mg/ml)0.5mlあるいはCANPinhibitor(0.5mg/ml)0.6mlを予め処置することによって抑制された。このverapamilの効果はoxalate存在下,bupivacaine投与3日後の咬筋ホモジネートCa uptakeにおいても再現された。(3)^<32>P遊離速度(V),総リン酸化中間体(EP)量およびturnover number(V/EP)は不変であった。3.bupivacaineはin vitroで:(1)濃度依存性(0.5-50mM)にSR定常状態Ca uptakeを低下させた。(2)この低下は,SRのCa放出channelを閉口させる条件のryanodine(750μM,10分間処置)およびprocaine(2mM)で抑制された。SLのNa,K-ATPaseとNa-Ca exchange活性はSRのCa uptakeと同様,bupivacaine投与3日後に著明な低下を示した。bupivacaineのSL機能に対する効果もverapamilで抑制された。bupivacaineのSR Ca輸送を低下させる効果は,Ca permeability,oxalate entryそしてCa pump unitに関連するATPase反応段階とは独立したものであり,gate channelからのCa放出増大に一部依存している可能性がある。また,SLの酵素および交換体タンパク機能もbupivacaineによって抑制を受けるがSRの場合でもSLの場合でも,L-型channelを介するCa流入の増大とそれにともなうCANPの活性化がbupivacaineによる骨格筋機能障害にリンクしていることが示唆さた。

Intracellular Ca accumulation causes damage to muscle cells and membrane functions. 1% bupivacaine was added to the right side of the white rice (2-2.5kg) and 0.9% saline was added to the left side of the rice (2 -2.5kg). After 1,3,5 days, the left and right side of the rice (2 - 2.5kg) were extracted and separated. 1. In the presence of oxalate, Ca uptake velocity and Ca ATPase activity of SR were measured. 2. In the absence of oxalate, bupivacine was injected 3 days later to modulate the separation of SR:(1) Ca uptake and Ca permeability were low in steady state. (2)Verapamil(0.125mg/ml)0.5ml, CANPinhibitor(0.5mg/ml)0.6ml, can be used to inhibit the growth of plants. In the presence of oxalate, bupivacine was administered 3 days after the onset of verapamil. (3)^<32>P dissociation velocity (V), total acidification intermediate (EP) quantity 3. bupivacaine is not in vitro:(1) Concentration dependence (0.5-50mM) for SR steady state Ca uptake is low. (2)The Ca emission channel of SR was inhibited by ryanodine(750μM,10 min treatment) and procaine(2mM). Na,K-ATPase and Na-Ca exchange activities of SL were similar to Ca uptake of SR, but decreased significantly after bupivacine administration for 3 days. bupivacine SL function is used to suppress verapamil. The Ca permeability,oxalate entry and Ca pump unit are related to the Ca transport of bupivacine SR. The Ca permeability,oxalate entry and Ca pump unit are partially dependent on the Ca emission from the gate channel. In the case of SL, the increase of Ca influx due to L-channel is also due to the activation of CANP and the inhibition of bupivacine by SR.

项目成果

Shun-suke Takahashi: "Local anaesthetic bupivacaine alters function of sarcoplasmic reticulum and sarcolemmal vesicles from rabbit masseter muscle." Pharmacology & Toxicology. 75(3-4). 119-128 (1994)

Shun-suke Takahashi：“局部麻醉剂布比卡因改变兔咬肌肌浆网和肌膜囊泡的功能。”