ウシ象牙芽細胞の分化と石灰化に影響する因子

影响牛成牙本质细胞分化和矿化的因素

• 批准号: 06771768
• 负责人: 里吉 正徳
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06771768/
• 关键词: 象牙芽細胞; 細胞培養; マトリゲル; フォスフォリン

培養開始後約1〜2週間で1本の突起を有する細胞が数多く見いだされた。さらに20日前後にアルカリフォスファターゼ活性が上昇し、その後下降傾向を示し、それに伴いオステオカルシン産生量と基質中へのミネラルの蓄積が上昇した。一方、顕微鏡観察において4〜6週後には鳥カゴ状のコロニーの形成が観察された。さらに8〜9週迄には石灰化されたノジュール形成が確認された。この石灰化物を細断し、2.5%ギ酸中で24時間、脱灰可溶化した後、抽出された蛋白を透析、凍結乾燥した。この中に含まれるリン酸化物は陰イオン交換HPLCおよびSDS-PAGEで分析した結果、リン酸化されたフォスフォフォリンと考えられた。また培養条件下におけるこの細胞の細胞外カゼインキナーゼ活性ならびに細胞外5'ヌクレオチターゼ活性は、骨芽細胞と比較して明らかな高値を示した。細胞外での基質のリン酸化な培養後期(石灰化期)に亢進していた。現在、上記の培養系を用いて細胞外基質リン酸化と石灰化との間に因果関係がみられるか否かを検討中である。

About 1 ~ 2 weeks after the start of culture, the number of cells with 1 primary process was increased. The activity of protein increased and decreased after 20 days, and the production of protein increased and the accumulation of protein increased. On the one hand, the formation of a bird-shaped kurona can be observed 4 to 6 weeks after the formation of the kurona. 8 ~ 9 weeks ago, the formation of lime was confirmed. The lime compound is finely divided, 2.5% sulfuric acid is added for 24 hours, ash is dissolved, protein is extracted, dialysis is performed, and freeze drying is performed. The results of HPLC and SDS-PAGE analysis of these compounds show that they are free from acid. Under culture conditions, the extracellular activity of these cells was higher than that of bone bud cells. Extracellular matrix acidification is promoted in the late culture stage (lime stage). Now, the culture system mentioned above is used to study the causal relationship between extracellular matrix acidification and calcification.