ポルフィロモナス・ジンジバリスの宿主細胞に対する細胞凝集メカニズムの解析

牙龈卟啉单胞菌对宿主细胞的细胞聚集机制分析

• 批准号: 06772008
• 负责人: 吉岡 昌美
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772008/
• 关键词: ポルフィロモナス・ジンジバリス; 宿主細胞; 細胞凝集

本研究では,すでにヒト歯肉繊維芽細胞(HGF)に対する細胞凝集作用を確認している381株の他に,ATCC33277,W50,W83,haral,JH4の5株についても同じ様に細胞凝集実験を行った。加えた細胞数に対する凝集塊数の割合(%Nv)を算出し,これを細胞凝集活性の指標とした。(この値が小さいほど凝集活性は高いことになる)その結果,調べた6株の中でharalとJH4は特に強い活性(%Nv=19.4,24.3)を示し,W50,381,ATCC33277がこれに続いた(%Nv=39.4,41.5,79.0)。これに対してW83では非常に弱い活性しか示さなかった。同じロットの各外膜小胞標品を用いて緬羊赤血球に対する凝集実験を行ったところ,6株すべての外膜小胞が凝集能を示したが,特にharal,381,JH4,W50の4株は,%Nvが各々15.3,15.7,22.6,29.7%と非常に強い凝集活性を示した。ATCC33277,W83も%Nvが52.9,86.5%と明らかな凝集能を示した。HGF及び緬羊赤血球に対する凝集活性を比較してみると,ほとんどの菌株ではパラレルであったが,381株ではHGFより赤血球に対する凝集活性が相対的に強かった。また,haral,JH4はいずれの細胞に対してもきわめて強い凝集活性を示した。以前の研究において,381のHGFに対する凝集作用がプロテアーゼの作用によるのではないかと考えられていたが,これが他の菌株にもあてはまるかどうかを確かめるために,細胞凝集実験に用いたロットについてカゼイン分解活性,BApNA分解活性,BLpNA分解活性を測定した。その結果,カゼイン分解活性は,細胞凝集活性の弱いW83株でも33277株の1.5倍以上の値を示し,BLpNA分解活性は381,W83以外の菌株では活性が検出されなかった。一方,BApNA分解活性は,多少のくい違いはあるものの,細胞凝集活性の強い4株が高い活性を示し,ATCC33277,W83株の活性は弱かった。以上の結果より,調べた基質の中ではBApNAを特異的に分解する酵素の関与が最も強いように思われた。但し,酵素活性の測定にはチオールが存在していること,各菌株の酵素活性のチオール依存性にも差があることから,単純な比較は無理である。今後,菌株あるいはロット数を増やすと同時に,現在明らかにされつつある他の生物活性についても検討することによって,本菌の細胞凝集機構をさらに解明していく予定である。

In this study, among the 381 strains that have been confirmed to have cell agglutination effects on human dental fibroblast cells (HGF), 5 strains including ATCC33277,W50,W83,haral, and JH4 were also tested for cell agglutination. Add the number of cells and the number of aggregations (%Nv) to calculate the index of cell aggregation activity. The results showed that 6 strains of medium haral and JH4 had strong agglutination activity (%Nv= 19.4, 24.3),W50,381,ATCC33277 had strong agglutination activity ( % Nv= 39.4, 41.5, 79.0). W83 is very active. The outer membrane vesicles of 6 strains of haral,381, JH4 and W50 showed very strong agglutination activity, especially with %Nv of 15.3, 15.7, 22.6 and 29.7%, respectively. ATCC33277, W83% Nv 52.9,86.5% The agglutination activity of HGF and red blood cells was compared, and the agglutination activity of HGF and red blood cells was compared. Haral,JH4 is a strong agglutinating activity in cells. In the previous study, 381 HGF was used to determine the aggregation activity,BApNA decomposition activity and BLpNA decomposition activity of HGF. As a result, the cell aggregation activity of strain W83 was 1.5 times higher than that of strain 33277. The cell lysis activity of strain BLpNA was 381. The cell aggregation activity of strain W83 was 1.5 times higher than that of strain W83. One side,BApNA decomposition activity, number of violations, cell aggregation activity, strong 4 strains, high activity,ATCC33277,W83 strain, weak activity. As a result, BApNA is the most important enzyme in the matrix. However, the enzyme activity of each strain is different from that of the other strains, and the enzyme activity of each strain is different from that of the other strains. In the future, the number of strains will be increased and at the same time, the biological activity of the strain will be determined.