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アデニン関連化合物のHPLC-化学発光検出システムの開発と生体試料分析への応用

腺嘌呤相关化合物HPLC-化学发光检测系统的开发及其在生物样品分析中的应用

基本信息

批准号：
06772105
负责人：
黒田直敬
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アデニン関連化合物のHPLC-化学発光検出システムを構築するにあたり、まず、フロー系を用いて発光反応条件を検討した。アデニンとフェニルグリオキサールとの反応によって得られる化学発光誘導体の発光観測には、過酸化水素、アルカリ水溶液、ジメチルホルムアミド(DMF)等が必要である。そこで以下に述べるフローインジェクションシステムをモデルとして化学発光検出を試みた。溶液A:キャリヤ-溶液、イソプロパノール(2-PrOH);溶液B:過酸化水素及び2-メルカプトエタノール(2-ME)を含む2-PrOHとDMFの等量混液;溶液C:NaOH水溶液。これらの溶液の送液は1台のペリスタ型ポンプを用いて行った。キャリヤ-溶液中に注入(10μL)された試料は、まず溶液Bと混和され、次いで溶液Cと合流したのち化学発光検出器に導かれる。試料にはアデニンとフェニルグリオキサールの反応混液を使用した。その結果、例えば、50mM過酸化水素、5mM2-ME及び0.15MNaOHを用いてそれぞれの流速を1.8mL/minに設定した場合、約30pmol/注入量のアデニンが検出でき(S/N=3)、フロー系を用いてアデニン誘導体の化学発光検出が可能であることが判明した。今後、アデニン関連化合物の高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による分離条件の検討、並びにポストカラム試薬による化学発光誘導体化条件の検討を行い、DNA等を含むアデニン化合物の一斉高感度分析法の開発を行う予定である。また、本誘導体化反応による化学発光誘導体を単離し、その構造・性質を明かにすることは、化学発光試薬を開発するうえで非常に重要であるため、これについても検討を行っていく予定である。

The chemical compound HPLC- was used to determine the temperature, etc. In order to improve the quality of the chemical products, such as chemical photoluminescence, acidified water, aqueous solution, DMF, and so on, it is necessary to apply the chemical method. In the following statement, we need to know how to use chemical light to make an attempt. Solution A: aqueous solution, 2-PrOH; solution B: mixture of acidified water and 2-ME containing 2-PrOH DMF; solution C:NaOH aqueous solution. The solution is delivered to the liquid, and one set is used for the first time. The solution was injected into the solution (10 μ L), the solution B was mixed, the solution C was combined, and the chemical light exchanger was added to the solution. The material is used to prevent the use of the mixture. The results of the test, example, 50mM acidified water, 5mM2-ME and 0.15MNaOH were set by the temperature response velocity (1.8mL/min) setting, the amount of 30pmol/ injection was determined by the output (S/N=3), and the temperature was detected by chemical spectroscopy. In the future, high-speed liquid chromatography, high-speed liquid chromatography, high-speed liquid It is very important to use the chemical system, the chemical system, the chemical system.