(24R)-24,25-ジヒドロキシビタミンD_3酵素イムノアッセイの開発
(24R)-24,25-ジヒドロキシビタミンD_3酵素イムノアッセイの開発
(24R)-24,25-二羟基维生素D_3酶联免疫分析法的开发
批准号：
06772101
负责人：
小林 典裕
金额：
$0.64万
依托单位：
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1994 至 --
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(24R)-24,25-ジヒドロキシビタミンD_3[24,25(OH)_2D_3]は,従来,不活性なビタミンD_3代謝物とされてきた.しかし最近,骨形成作用を有する可能性が示唆され,新しい骨疾患治療薬として期待されている.このため,簡便で迅速な体液中24,25(OH)_2D_3定量法の確立が切望されているが,現在,満足のいく方法はみられない.そこで,24,25(OH)_2D_3酵素イムノアッセイ(EIA)の開発を目的として新規ハプテンを合成し,抗24,25(OH)_2D_3特異抗体の調整を試みた.【実験・結果】まず,ハプテン3-HG[24,25(OH)_2D_33-hemiglutarate]及び11a-HG[11a-hemiglutaryloxy-24,25(OH)_2D_3]を,それぞれデヒドロエピアンドロステロン及びその11a-水酸化体を出発物質に用い,各々19工程,22工程で合成した.ついで,11a-HGのウシ血清アルブミン結合体を調整してウサギ3羽を免疫し,得られたポリクローナル抗24,25(OH)_2D_3抗体(Ab-11)3種の諸性質をRIAにより検討した.これらはいずれも優れた力価(至適希釈率1:25000-1:330000)と親和力(Ka=0.2-1.0×10^<10>M^1)を示し,極めて高感度な検量線を与えた.また,側鎖構造の識別能にやや欠けるものの,24,25(OH)_2D_3のA環部分を良好に認識することが判明した.【考察】ハプテン3-HGを用いて免疫するとき,側鎖の認識に優れ,Ab-11のそれと相補的な特異性の抗体(Ab-3)が得られるものと期待される.したがって,Ab-3またはAb-11のいずれか一方を用いてイムノアフィニティークロマトグラフィー(IAC)を行い,試料から妨害代謝物を除去したのち,もう一方の抗体によるEIAに付すことで,信頼性の高い測定値が得られるものと期待される.現在,本IAC/EIAシステムの開発を検討中である.
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Norihiro Kobayashi: "Specificity of the polyclonal antibodies raised against a novel 25-hydroxyvitamin D_3-bovine serum aldumin conjugate linked throuqh the C-11a position" J.Steroid Biochem.Mol.Biol.48. 567-572 (1994)
Norihiro Kobayashi：“针对通过 C-11a 位点连接的新型 25-羟基维生素 D_3-牛血清 aldumin 缀合物产生的多克隆抗体的特异性”J.Steroid Biochem.Mol.Biol.48。
Norihiro Kobayashi：“针对通过 C-11a 位点连接的新型 25-羟基维生素 D_3-牛血清 aldumin 缀合物产生的多克隆抗体的特异性”J.Steroid Biochem.Mol.Biol.48。
DOI：
--
发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
Norihiro Kobayashi: "Syntheses of 11a-(4-carboxypropanoyloxy)-1a,25-dihydroxyvitamin D_3 and 11a-(4-carboxybutanoyloxy)-1a,25-dihydroxyvitamin D_3:Novel haptenic derivatives for production of highly specific antibodies to 1a,25-dihydroxyvitamin D_3" J.Che
Norihiro Kobayashi：“11a-(4-羧基丙酰氧基)-1a,25-二羟基维生素 D_3 和 11a-(4-羧基丁酰氧基)-1a,25-二羟基维生素 D_3 的合成：用于生产 1a,25- 高度特异性抗体的新型半抗原衍生物
Norihiro Kobayashi：“11a-(4-羧基丙酰氧基)-1a,25-二羟基维生素 D_3 和 11a-(4-羧基丁酰氧基)-1a,25-二羟基维生素 D_3 的合成：用于生产 1a,25- 高度特异性抗体的新型半抗原衍生物
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
Norihiro Kobayashi: "Synthesis of (24R)-11a-(4-carboxybutyryloxy)-24,25-dihydroxyvitamin-D_3:A novel haptenic derivative producing antibodies of hiqh affinity for (24R)-24,25-dihydroxyvitamin D_3" J.Chem.Soc.,Perkin Trans.1. 269-275 (1994)
Norihiro Kobayashi：“(24R)-11a-(4-羧基丁酰氧基)-24,25-二羟基维生素-D_3 的合成：一种新型半抗原衍生物，可产生对 (24R)-24,25-二羟基维生素 D_3 具有高亲和力的抗体”J.Chem
Norihiro Kobayashi：“(24R)-11a-(4-羧基丁酰氧基)-24,25-二羟基维生素-D_3 的合成：一种新型半抗原衍生物，可产生对 (24R)-24,25-二羟基维生素 D_3 具有高亲和力的抗体”J.Chem
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
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作者：
[]
通讯作者：
Norihiro Kobayashi: "Production of a group-specific antibody to 1a,25-dihydroxyvitamin D and its derivatives having the 1a,3β-dihydroxylated A-ring structure" Steroids. 59. 404-411 (1994)
Norihiro Kobayashi：“针对 1a,25-二羟基维生素 D 及其具有 1a,3β-二羟基化 A 环结构的衍生物的组特异性抗体的生产”类固醇。 59. 404-411 (1994)
Norihiro Kobayashi：“针对 1a,25-二羟基维生素 D 及其具有 1a,3β-二羟基化 A 环结构的衍生物的组特异性抗体的生产”类固醇。 59. 404-411 (1994)
DOI：
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发表时间：
期刊：
影响因子：
--
作者：
[]
通讯作者：
抗メタタイプ抗体を用いる低分子生理活性物質の超高感度イムノアッセイ法の開発
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批准号：08672469
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项目类别：Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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资助金额：$1.41万
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财政年份：1996
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负责人：小林 典裕
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依托单位：
イムノアフィニティークロマトグラフィーを用いる活性型ビタミンD_3分析法の開発
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批准号：05771953
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项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额：$0.58万
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财政年份：1993
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负责人：小林 典裕
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依托单位：
抗ビタミンD_3抗体の調製と病態解析への応用
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批准号：02857332
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项目类别：Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额：$0.51万
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财政年份：1990
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负责人：小林 典裕
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依托单位：