アルデヒド類のHPLC化学発光法の開発と生体関連物質分析への適用

醛类高效液相化学发光方法的建立及其在生物相关物质分析中的应用

• 批准号: 06772117
• 负责人: 石田 淳一
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Fukuoka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06772117/
• 关键词: アルデヒド; 化学発光; HPLC; 誘導体化

アルデヒド類に高感度な化学発光誘導体化試薬として、4,5-ジアミノフタルヒドラジド(DPH)を開発した。DPHは、弱酸性下アルデヒド類と反応し、ベンズイミダゾール誘導体を生成する。生じたベンズイミダゾール誘導体は、アルカリ性下、フェリシアン化カリウムの存在で過酸化水素と反応し化学発光する。これを利用して、まずアルデヒド類の高感度HPLC化学発光検出による基本的定量法を設定した。モデル化合物として芳香族アルデヒドを3種(ベンズアルデヒド、p-アニスアルデヒド、p-トルアルデヒド)脂肪族アルデヒドとしてエナントアルデヒドを選び、HPLC条件及び最適化学発光誘導体化条件の検討を行った。アルデヒド類は、塩酸酸性下、加熱することによりDPH誘導体となった。これら誘導体は、単一溶離逆相HPLCにより20分以内に分離検出された。本法の検出限度は、10fmolレベルと高感度であった。次に、DPHによる反応生成物の構造及びその発光特性を調べる目的で、p-カルボキシアルデヒド及びp-トルアルデヒドについて、その反応生成物を単離した。生成物は、種々の機器データから図のようなベンズイミダゾール構造であることを明らかにした。さらにこれら誘導体の発光特性を調べる目的で、種々の発光条件をルミノールと比較しながら検討した。その結果、これらの化学発光体は、ルミノールに比べ、3から7倍強く発光することがわかった。現在本誘導体化法を生体内DBH活性測定に応用検討中である。また、反応生成物は、発光試薬として、過酸化物計測などに適用可能である。

ア ル デ ヒ ド class に Gao Gan degrees な chemical 発 photoinduced body turn try 薬 と し て, 4, 5 - ジ ア ミ ノ フ タ ル ヒ ド ラ ジ ド (DPH) を open 発 し た. DPH は, under weak acid ア ル デ ヒ ド class と anti 応 し, ベ ン ズ イ ミ ダ ゾ ー ル inductor を generated す る. Raw じ た ベ ン ズ イ ミ ダ ゾ ー ル induced は, ア ル カ リ under, フ ェ リ シ ア ン change カ リ ウ ム の exists water acidification passes で element と 応 し chemical 発 light す る. <s:1> れを utilizes the <s:1> て and まずア デヒド デヒド types of high-sensitivity HPLC chemical luminescence 検 to develop による basic quantitative methods を to set up た た. モ デ ル compound と し て aromatic ア ル デ ヒ ド を three (ベ ン ズ ア ル デ ヒ ド, p - ア ニ ス ア ル デ ヒ ド, p - ト ル ア ル デ ヒ ド) aliphatic ア ル デ ヒ ド と し て エ ナ ン ト ア ル デ ヒ ド を び, HPLC conditions and the optimal chemical 発 photoinduced び body condition の 検 line for を っ た. Youdaoplaceholder0 デヒド デヒド class, under salic acid acidic conditions, heating する する とによ DPH inducer となった. <s:1> れら inducer された, 単 - dissolution and reversed-phase HPLCによ 単 within 単 20 minutes に to separate 検 out された. This act stipulates 検 output limit 検, 10fmolレベ レベ と と high sensitivity であった. に, DPH に よ る anti 応 products の structures and び そ の 発 characteristics を light tones べ る purpose で, p - カ ル ボ キ シ ア ル デ ヒ ド and び p - ト ル ア ル デ ヒ ド に つ い て, そ の anti 応 products を 単 from し た. Products は, kind of 々 の machine デ ー タ か ら 図 の よ う な ベ ン ズ イ ミ ダ ゾ ー ル tectonic で あ る こ と を Ming ら か に し た. さ ら に こ れ ら inductor の 発 characteristics を light tones べ る purpose で, kind of 々 の 発 light conditions を ル ミ ノ ー ル と compare し な が ら beg し 検 た. そ の results, こ れ ら の chemical 発 light body は, ル ミ ノ ー ル に than べ, 3 か ら 7 times strong く 発 light す る こ と が わ か っ た. Now, the induction induction method for the determination of DBH activity in を organisms に応 is used in 検 to である. Youdaoplaceholder0, counter応 products, photogenic reagents と て, acidified substances meter な <s:1> に applicable possibilities である.