ロイコトリエン産生調節に関わるHPETEの代謝機構の解明

阐明 HPETE 参与白三烯产生调节的代谢机制

• 批准号: 06780487
• 负责人: 今井 浩孝
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780487/
• 关键词: リポキシゲナーゼ; HPETE; CL-HPLC; グルタチオン; リン脂質ヒドロペルオキシドグルタチオンペルオキシダーゼ; クローニング; LTB_4; HETE

私はロイコトリエン産生調節に関わるHPETEの代謝機構の解明を明らかにするためにラットの炎症性細胞を用いて研究を行い、本年度において以下の知見を明らかにした。1、ルミノール、チトクロームCを用いた化学発光を利用する、高速液体クロマトグラフィー(CL-HPLC)を用い、活性化された白血球の細胞内における、微量な5-HPETEを定量的に解析できる系を開発した。2、本系を用いて、A23187(カルシウムイオノファー)で、RBL-1細胞(ラット好塩基球系癌細胞)を刺激した際の、5-HPETEのLTB4、HETEへの代謝機構を検討した。その結果、グルタチオンの枯渇化剤であるジエチルマレイミドの処理により酸化ストレスをかけると、細胞内の5-HPETEの蓄積が顕著に増加することが明らかとなった。またリポキシゲナーゼの代謝物(LTB4、HETE)の総量は大きく増加することが明らかとなった。しかし、グルタチオンを枯渇してもLTB4、HETEの量比には影響しないことが明らかとなった。3、ラット腹腔好中球、ラット腹腔マクロファージ、RBL-2H3(ラット好塩基球系癌細胞)では、アラキドン酸を細胞外から添加することにより、リポキシゲナーゼ代謝物の産生量は、大きく増加するが、この時、HPETEからLTB4への代謝よりも、HETEへの代謝の割合が大きくなることが明らかとした。4.HPETEの代謝に関わると考えられる酵素の一つであるラットリン脂質ヒドロペルオキシドグルタチオンペルオキシダーゼの遺伝子をラット脳cDNAライブラリーからクローニングすることに成功した。本遺伝子はセレノシステインをコードするTGAコドンを有する170アミノ酸からなっていた。本酵素のmRNAは広く臓器に存在していたが、特に精巣で高い発現が見られた。

The understanding of HPETE metabolic machinery involved in the regulation of HPETE production is being studied in this year's study, and the following findings are being made 1. The development of a system for the analysis of 5-HPETE in the intracellular phase of activated leukocytes and the quantitative analysis of trace amounts of 5-HPETE. 2. To investigate the metabolic mechanism of 5-HPETE, LTB4 and HETE when we stimulate RBL-1 cells with A23187, A23187 and 5-HPETE. As a result, the accumulation of 5-HPETE in cells increased during treatment. It is clear that the total amount of the metabolites (LTB4, HETE) of will increase significantly. The volume ratio of LTB4 and HETE has an impact on the quality of the products. 3. The amount of metabolites produced, the amount of metabolites increased, the amount of metabolites increased, the amount 4. HPETE's gratitude is related to the successful creation of a link between the gene of the enzyme and the gene of the lipid lipid complex, which is linked to the cDNA link. This article is about the TGA requirements for the first time in 170 years The mRNA of this enzyme is expressed in the middle of the cell, and in the middle of the cell.