新しい測定法による生体系の高速反応の解析

使用新测量方法分析生物系统中的快速反应

• 批准号: 06780503
• 负责人: 増井 良治
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780503/
• 关键词: Caged化合物; 光分解性化合物; 酵素反応

酵素反応の速度論的解析にCaged化合物を用いる際に生じる問題点を明らかにするため,ニトロベンジル基をもつCaged化合物を用いて,種々の条件における酵素活性に対する影響を調べた。まず,Caged化合物の光分解の効率は,その溶液のpH,温度,暖衝剤の種類,硫安の存在,Caged化合物の種類によらず一定であることが分かった。ただし,アルカリ性側では反応生成物の分解が起こる場合があった。また,励起波長は254nm,365nm(Nd:YAGレーザーの4倍波,3倍波にあたる)のどちらでも分解効率は変わらなかった。次に,Nd:YAGレーザー266nmの光照射によるCaged化合物の分解速度について調べた。pH4〜8の範囲では,分解速度はほぼpHに比例し,酸性側でより速くなった。しかし,光分解により生成するアミノ酸量は,Cagedアミノ酸の濃度に依存せず,ほぼ一定の値となった。つまり,そのCaged化合物の初期濃度をある濃度以上に上げても,特定の条件での分解濃度は増加しないことが分かった。このことから,光分解によって生じる有効濃度を上げるためには,光の強度を上げるか,分解効率の高いCaged化合物を用いることが必要であることが明らかとなった。そこで、より高い光分解能をもつジメトキシベンゾイン型のCaged化合物の合成を行なうことにした。Caged化する生理活性物質として,高い光分解活性を示すリン酸エステル結合を含むCaged ATPを選んだ。まず,ジメトキシベンズアルデヒドからジメトキシベンゾインを合成し,次に,塩化ホスホリルによって直接その水酸基をリン酸化しようとしたが,副反応が問題となり,目的産物を効率良く得ることができないと予想されていた。そこで,リン酸化する水酸基以外の反応性官能基を保護した後,リン酸化を行なう方向で現在合成を試みている。

Analysis of Enzyme Reaction Velocity Theory, Caged Compounds, Problems with Caged Compounds, and Problems The ベンジジジをもつCaged compound is used and the conditions of the 々の condition are the enzyme activity and the を adjust the べた.まず, the efficiency of photolysis of Caged compound, the pH of solution, temperature, type of warm water, the presence of sulfide, the type of Caged compound, and the certain であることがdividing.ただし, アルカリsexual side では reactive product の decomposition がrise こる occasion があった. The excitation wavelength is 254nm, 365nm (Nd: YAG レーザーの4 times wave, 3 times wave にあたる) and the decomposition efficiency is は変わらなかった. The decomposition speed of Nd:YAG レーザー266nm light irradiation and the Caged compound are adjusted accordingly. The range of pH is 4~8, the decomposition speed is the pH ratio, and the acidic side is the speed.しかし, photolysis of により generates するアミノacid quantity は, Caged アミノacid のconcentration にdepends せず, ほぼ必の値となった.つまり, そのCaged compound's initial concentration をある concentration and above に上げても, specific conditions でのdecomposition concentration は Increase plus しないことが分かった.このことから, photolysis によって生じるeffective concentration を上げるためには, light intensity を上げるか, the decomposition efficiency of Caged compounds is high and the use of Caged compounds is necessary.そこで, より高いPhotolysis energy をもつジメトキシベンゾイン type Caged compounds are synthesized を行なうことにした. Caged physiologically active substances, high photolytic activity, high photolysis activity, and high-density acid, combined with Caged ATP, are selected.まず,ジメトキシベンズアルデヒドからジメトキシベンゾインを合し,子に,婩化ホスホリルによってDirect その水The acidification of acid-based をリン is done, the side reaction problem is solved, the target product is obtained with good efficiency, and the target product is obtained with good efficiency. After そこで, リン acidified する water acid group and protected the reactive functional groups other than した, リン acidified を line なう direction and now synthesized を trial みている.