多孔性ガラスによるタンパク質の高次構造固定法の開発と2状態モデルの直接的検証

利用多孔玻璃开发蛋白质构象固定方法并直接验证二态模型

• 批准号: 06780542
• 负责人: 柴山 修哉
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780542/
• 关键词: 多孔性ガラス; ヘモグロビン; 2状態モデル

〈多孔性ガラスでヘモグロビンを安定に封入する技術開発〉、Ellerbyら(1992 Science 255,1113.)によって報告されたゾル-ゲル法を改良して、ヒトのオキシ型あるいはデオキシ型ヘモグロビンを可逆的酸素脱着能を保持したまま透明な多孔性ガラスに(リン酸緩衝液を細孔に含む状態のまま)封入することに成功した。この様にして初期状態をオキシ型あるいはデオキシ型で封入したヘモグロビンの光吸収スペクトルを通常の溶液中のスペクトルと比較したところ、両スペクトル共完全な一致が得られた。〈機能測定の結果〉初期状態をデオキシ型で封入したヘモグロビンとオキシ型で封入したヘモグロビンの酸素平衡機能を比較すると、両者共協同性は消失しており、酸素親和性の値は約500倍異なっていた。また、この時観測された酸素平衡定数は、通常のヘモグロビンに対する1個目及び4個目の酸素平衡定数とほぼ一致していたので、ヘモグロビン分子は封入時の高次構造を保持したまま安定な状態で多孔性ガラス中に存在し、リガンド脱着に伴う機能変化はほぼ完全に抑えられていることが結論された。〈構造測定の結果〉デオキシヘモグロビンの光吸収スペクトルはタンパク質の高次構造変化に伴い変化することが過去の研究から知られている。そこで、初期状態をオキシ型で多孔性ガラス中に封入した試料とデオキシ型で封入した試料のデオキシスペクトルを比較してみたところ、両者の差スペクトルは過去に報告されたデオキシRとデオキシTの差スペクトルに大きさ、形が一致した。〈まとめ〉本研究の結果は、2状態モデルの基本仮定の一つとなる4次構造と機能の一対一の関係を支持するとともに、タンパク質の構造と機能の関係を調べる新しい手法としてゾル・ゲル法が使えることを示唆している。

"porous materials, thermal stability and diazepam closure", Ellerby (1992 Science 255, 1113.) In this paper, the method was improved, and the reversible acid exfoliation was able to maintain the transparency and porosity. In the early stage, it was sealed in the form of light absorption, and so on. In the early stage, the status test results > the initial status test results show that the acid balance machine is capable of comparing the balance of acid, acid and sex in the same sex. It is necessary to determine the acid balance, the acid balance, the It is necessary for the company to be able to achieve a complete reduction in the performance of the equipment. < Test results > do you want to know how to use light absorption to improve the quality of the chemical system? you have learned about the results of the previous research. In the early stage, the porous material is sealed in the porous material, the material is sealed, and the material is sealed. According to the results of this study, the results of this study show that the machine is capable of operating four times at a time. The machine can support the operation of the machine, and the machine can improve the performance of the machine.