架橋混成ヘモグロビンを用いたアロステリック効果の研究

使用交联混合血红蛋白的变构效应研究

• 批准号: 05780484
• 负责人: 柴山 修哉
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05780484/
• 关键词: ヘモグロビン; アロステリック効果; 酸素平衝曲線; X線結晶解析

1.アロステリックタンパク質共通の分子論的機序を調べる目的で、ヘモグロビン分子の酸素結合における中間状態分子のモデル系をニッケルボルフィリン(デオキシヘムのモデル)による金属置換と分子内架橋(2量体組換え反応の防止)の合併による架橋金属置換混成ヘモグロビンで構築した。今年度行った研究では、全部で8種類ある中間状態分子のうち、研究の重要性が高いと思われる酸素分子の2個結合した4種類の中間状態分子に着目し、これら4分子のモデルとなる高純度試料の調整を行った。2.これらモデルを使った2段階酵素平衝曲線の測定から以下の結果を得た。(1)デオキシヘモグロビンではalphaサブユニットがbetaサブユニットと比較して約3倍高い酵素親和性を示す。(2)酵素化初期段階でのヘム間相互作用の大きさはbeta1beta2、alpha1beta1、alpha1beta2、alpha1alpha2の順に大きくなる。(3)これらのヘム間相互作用はタンパク質の高次構造変化を介して伝わったものと考えてもそれほど大きな矛盾は出てこない。3.本研究の主要な計画の1つに入っていた中間状態分子の高分解能X線結晶解析は予定していたよりも難しい実験であることが解ってきた。顕微分光器によるヘモグロビン結晶の酸素平衝曲線測定で結晶格子力の影響を調べたところ、酸素親和性の高い異常ヘモグロビンを含むほとんどのヒトヘモグロビンは、結晶中でダオキシヘモグロビン型の酸素親和性の低い構造に閉じこめられてしまうことが解った。したがって、中間状態を溶液に近い状態で結晶中に固定することは極めて難しいと思われる。現時点では先ず、結晶格子力のもとになる分子間水素結合に関与するアミノ酸残基を他のアミノ酸に置換した異常ヘモグロビンを大腸菌で合成させ、結晶格子力を減少させたヘモグロビン結晶を作る方向で実験を進めている。

1. In this paper, the molecular theory of molecular theory is common, and the molecular acid is combined with the molecular acid in the molecular theory. in this paper, the common molecular theory of molecular theory is based on the order of molecular theory in molecular theory. the molecular acid is combined with the molecular acid. the metal is placed in the molecular framework. This year, we have conducted a research program, a molecular experiment in all eight categories, and two high-level molecular studies in combination with four types of molecular weight, and four molecules have been used to improve the quality of materials. two。 The results show that the following results are satisfactory for the determination of the enzyme balance curve of the second segment of enzyme. The main results are as follows: (1) the enzyme level is about 3 times higher than that of the alpha, which is about 3 times higher than that of the mother. (1) the enzyme level is about 3 times higher than that of the other two. (1) the enzyme level is about 3 times higher than that of the other two. (2) beta1beta2, alpha1beta1, alpha1beta2, alpha1alpha2 in the early stage of zymogenation. (3) the interaction between two parties is related to the development of high-order chemical engineering. The examination of the relationship between the two parties leads to the occurrence of conflicts between the two countries. 3. The main purpose of this study is to analyze the X-ray analysis of the high decomposition energy of polymorphous molecules. The differential optical instrument was used to determine the acid balance curve and the lattice force was used to determine the acid balance curve. The results show that the lattice force has an effect on the concentration of acid, acid and sex. The results show that there is a significant difference in the concentration of acid and acid in the crystal. In the temperature field and intermediate state solution, there is a steady state in the crystal. At the same time, the combination of molecular water, temperature, temperature