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糖蛋白発現細胞株を使ったウイルス媒介膜融合の制御メカニズムの研究

利用糖蛋白表达细胞系研究病毒介导的膜融合的控制机制

基本信息

批准号：
06780584
负责人：
西尾真智子
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.既に樹立したパラインフルエンザ4A型ウイルスのF蛋白を構成的に発現している細胞株、HN蛋白を構成的に発現している細胞株、F蛋白とHN蛋白を両方構成的に発現している細胞株を使って細胞表面に発現している蛋白をモノクローナル抗体を使って調べた。その結果、樹立した各細胞株で発現量の違いはあったがすべて表面に発現していた。これらの発現細胞株のうち強いものを1つずつ選んで以下の実験に使用した。実験に使用した各発現細胞はFACScanで蛋白の発現量を感染細胞と比較したところ同等以上であった。また細胞表面のシアル酸の量を測定したところ、HN蛋白を構成的に発現している細胞株とF蛋白とHN蛋白を両方構成的に発現している細胞株ではF蛋白を構成的に発現している細胞株や処理していないHeLa細胞に比べて約75%に減少した。2.細胞融合はF蛋白を構成的に発現している細胞株とHN蛋白を構成的に発現している細胞株を混ぜても起こらないし、F蛋白とHN蛋白を両方構成的に発現している細胞株だけでも起こらない。しかし、F蛋白を構成的に発現している細胞にHN蛋白をtransientに発現させると融合が起こる。またパラインフルエンザ2型ウイルスのHN蛋白をtransientに発現させても融合が起こった。以上のことから細胞融合には両蛋白が同一の細胞に発現していることが不可欠であるが、HN蛋白を構成的に発現していると融合しないことが明らかになった。3.両方構成的に発現している細胞株とHeLa細胞を混ぜると小さな融合が起こり、F蛋白を構成的に発現している細胞株を混ぜると大きな融合が見られた。しかし、HN蛋白を構成的に発現している細胞株と混ぜても融合は見られなかった。したがってF蛋白を発現していると融合を促進するような働きがあり、HN蛋白を発現していると抑制するような働きがあるように思われる。

1. The structure of the established F-containing F protein type 4A The に発见している cell line and the に発见している cell line composed of HN protein strain, F protein and HN protein are composed of に発 appearances and HN proteins. The result and establishment of each cell line are as follows: The current cell line of これらの発 is strong and the いものを1 is selected and the following の実験に is used. We used FACScan to detect the amount of proteins in each cell and the infected cells and compared them with each other, so that they were equal or better.またThe amount of のシアル acid on the surface of the cell is measured したところ, HN protein を is composed of に発成している cell strain とF protein and HN protein are composed of を両にThe F protein of the HeLa cell strain, which is composed of the HeLa cell strain, is reduced by about 75% compared to the HeLa cells. 2. Cell fusion: a cell strain composed of F protein and a cell strain composed of HN protein The に発成している cell strain is composed of a mixture of ぜても起こらないし and F protein and HN protein を両. The cells composed of HN protein and F protein are transient and fused.またパラインフルエンザType 2 ウイルスのHN protein をtransientに発成させてもfusionが开こった. The above-mentioned cell fusion is the same as the protein, and the same cells are present.あるが and HN protein are composed of に発成しているとfusion しないことが明らかになった. 3. The above-mentioned combination of the HeLa cell line and the HeLa cell line was mixed together. The に発成している cell strain composed of こり and F protein を is mixed with the ぜると大きな fusion が见られた. It is a hybrid cell line composed of HN protein and HN protein.したがってF protein を発appears しているとfusion をpromote するような働きがあり, HN protein appears and inhibits it.