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マイオプラズミンC1融合タンパク質を用いた決定因子局在化メカニズムの再構成

使用肌浆蛋白 C1 融合蛋白重建决定簇定位机制

基本信息

批准号：
06780622
负责人：
西方敬人
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Konan University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780622/
关键词：
ホヤマイオプラズミンC1 決定因子細胞骨格

项目摘要

ホヤ卵内における筋肉細胞分化決定メカニズムの分子的実体を、決定因子複合体という新たな観点から明らかにするため以下のような実験を行った。pGEX-2T発現ベクターにマイオプラズミンC1cDNAを組み込み、グルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)とマイオプラズミンC1の融合タンパク質を大腸菌に作らせた。その融合タンパク質にホヤ卵あるいは卵巣のホモジュネートを加え、融合タンパク質に結合したタンパク質を解析した。対照実験としてGSTのみのものを用い、1、金属イオン濃度変化させ、2、細胞骨格の阻害剤を作用させて卵内の変化の様子を再現することを試みた。1の結果:いろいろ条件において、p58との結合は保たれ、p58とマイオプラズミンC1との結合が比較的強固であることが示唆された。しかし、チューブリンやアクチンとの結合は観察されず、直接の結合が無い可能性も示唆された。さらに二次元電気泳動より、結合するすべてのタンパク質を検討したところ、マイオプラズミンC1との結合を明らかに示す分子を新たに見付け出すことはできなかった。2の結果:細胞骨格の阻害剤(グリセオフルビン、タキソ-ル、サイトカラシン)を加え、結合するチューブリン、アクチン、中間径フィラメントの分子種にどの様な変化が起こるかをウエスタンブロットにより検討したが、これまでのところ明らかな変化は観察されなかった。このことは、細胞骨格繊維の状態とマイオプラズミンC1との結合の有無とが関係していないこと示すとも考えられるが、融合タンパク質を用いた実験系の再検討も必要であり、マイオプラズミンC1の部分的な配列を用いた融合タンパク質の作成を進めていたところであった。震災の影響で不十分なデーターも多いが、p58との結合や微量かつ比較的多数の分子の関与が示唆され、これから決定因子複合体をさらに明らかにするために重要な知見が得られた。

The cellular differentiation of the muscle muscle in the egg determines the body of the molecule, and the determining factor is a copy of the molecule. PGEX-2T has shown that it is necessary to improve the performance of the C1cDNA system. This is the first step in the development of the virus. This is the first step in the development of the virus. This is the first time that the virus has been fused. This is the result of the fusion of the bacteria. The combination of the fusion method and the combination of the fusion method and the fusion method can be used in the analysis of the fusion process. According to the results of the GST test, 1. The metal is used to reduce the temperature. 2. The cellular bone lattice is used to prevent the damage. The effect is changed in the egg. 1 results: the combination of p58, p58, and p58, respectively. It is necessary to combine the observation of the information and the possibility that there is no possibility to instigate the failure. The two-dimensional electrophoretic swimming exercise, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoresis, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional electrophoretic swimming, the combination of the two-dimensional 2 results: the cell bone structure is used to prevent and treat the disease, and the combination of the two is used in this paper. The results are as follows: in this paper, the results are as follows: 1. Results: the results show that the cell bone lattice is used to prevent and treat the disease, the combination of the drug, the drug, the molecular model, the effect, the effect, the effect and the effect. The combination of the data in the cell, the cell, The impact of the shock is not very good. Most of the molecular markers in the microscale are combined with the molecular markers and the determination factors in the microscale. The determination factors are complex.