複数のRNA結合タンパク質の包括的解析とホヤ卵内母性mRNAの高次機能の解明

海鞘卵中多种RNA结合蛋白的综合分析及母体mRNA高级功能的阐明

• 批准号: 10174228
• 负责人: 西方 敬人
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Konan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10174228/
• 关键词: ホヤ; RNA結合タンパク質; 母性因子; RNA認識モチーフ; Yボックスタンパク質; Huタンパク質; ムサシ; 決定因子

ホヤ卵内には、あらかじめ局在する分化決定因子の存在が知られている。そのホヤ卵内で発現しているRNA結合タンパクを解析し、母性mRNAとその翻訳制御が初期発生に果たす役割を明らかにする事を目的に、これまでに以下α種類のRNA結合タンパク質遺伝子を単離し、その発現様式を明らかにした。1 :CiYBl,2,3:よく保存されたcold shock domainを持っており、マスキングタンパクとして知られるY-bOXproteinのホモログである。3つのアイソフォームは1つの遺伝子から選択的スプライシングにより作られる。ゲルシフトアッセイにより、in vitroで、Gに富むRNAへの結合能があることを示した。2 :CiHul;RNA recognition motif(RRM)型のRNA結合ドメインを3つ持ち、神経分化に関わるHuDと比較的高いアミノ酸配列の同一性を示した。卵内で高い発現を示し、尾芽胚期においては、神経細胞では発現せず、間充識細胞でのみ強い発現を示した。3 :CiMsil;MusashiタイプのRNA結合タンパク質である。N末側にRRMを2つ持つ。卵内でも高い発現を示し、のう胚期以降予定神経細胞でzygoticな発現が見られはじめ、神経管形成時の神経細胞で高い発現を示す。4 :CiRGG1;RGG box(Arginine-Glycine-Glycineの繰り返し配列)とRRMを持つ。未受精卵で高い発現を示し、2細胞期のごく短期間胚の前側へ局在する。このような局在性を示す分子は、これまで知られていない。5 :CiGRPl,2;コールド・ショックにより誘導されるGlycine-rich RNA結合タンパク質のホモログと考えられる。未受精卵および初期卵割期と神経胚期以降の脳で高い発現を示した。

The に に and あら じめ じめ in the ホヤ oocyte are found to have が knowledge of the する differentiation determinants <s:1>, られて and られて る る る. そ の ホ ヤ egg で 発 now し て い る rna-binding タ ン パ ク を analytical し, maternal mRNA と そ の turn 訳 suppression が early 発 に raw fruit た す "を cut Ming ら か に す る に を purpose, こ れ ま で に the following types of alpha の rna-binding タ ン パ ク qualitative heritage 伝 son を 単 し, そ の 発 presently others type を Ming ら か に し た. 1: CiYBl, 2, 3: よ く save さ れ た cold shock domain を hold っ て お り, マ ス キ ン グ タ ン パ ク と し て know ら れ る Y - bOXprotein の ホ モ ロ グ で あ る. 3 つ の ア イ ソ フ ォ ー ム は 1 つ の posthumous son 伝 か ら sentaku of ス プ ラ イ シ ン グ に よ り as ら れ る. ゲ ル シ フ ト ア ッ セ イ に よ り, the in vitro で, G に rich む RNA へ の binding energy が あ る こ と を shown し た. 2 :CiHul; RNA recognition motif (RRM) の rna-binding ド メ イ ン を 3 つ hold ち, god 経 differentiation に masato わ る HuD と comparative high い ア ミ ノ acid with column の identity を shown し た. High egg で い 発 now を し, tail bud embryonic stage に お い て は, god 経 cell で は 発 now せ ず, between knowledge cell で の み strong い 発 を now shown し た. 3 :CiMsil; Musashiタ プ プ is bound to タ パ パ casein である. At the end of N, にRRMを2 を holds に. High egg で も い 発 now を し, の う from embryonic stage to the beach 経 cells で zygotic な 発 が now see ら れ は じ め, god 経 tube formed の 経 cell で high い 発 を shown す now. 4 :CiRGG1; RGG box(Arginine-Glycine-Glycine <s:1> Shigemitsu Tengen line)とRRMを holds と. Unfertilized egg で high で occurrence を indicates that <s:1>, 2-cell stage <s:1> ごく, short-term embryonic embryonic へ locality is in する. The local presence of を indicates that す molecules を and <s:1> れまで know られて な な な. 5 :CiGRPl,2; コ ー ル ド · シ ョ ッ ク に よ り induced さ れ る Glycine - rich rna-binding タ ン パ ク qualitative の ホ モ ロ グ と exam え ら れ る. Unfertilized egg および initial oocyte stage と neuroembryonic stage and subsequent stages 脳で high および occurrence を showing た た.

项目成果

Okubo,M.-A.: "Generation and characterization of a monoclonal antibody,mH1,raised against mitotic HeLa cells." Development Growth & Differentiation. 41(in press). (1999)

Okubo,M.-A.：“针对有丝分裂 HeLa 细胞的单克隆抗体 mH1 的生成和表征。”

Wada,M.R.: "The expression of the protochordate homologue of the proteasome regulatory subunit Rpn12 is transcriptionally and post-translationally regulated during cleavage stage." Zoological Science. 16(in press). (1999)

Wada,M.R.：“蛋白酶体调节亚基 Rpn12 的原索动物同源物的表达在裂解阶段受到转录和翻译后调节。”

Chiba,S.: "Interactions between cytoskeletal components during ooplasmic segregation in the myoplasm of ascidian eggs." Development Growth & Differentiation. 41(in press). (1999)

Chiba,S.：“海鞘卵肌质中卵质分离过程中细胞骨架成分之间的相互作用。”

Wada,M.R.: "An alternatively spliced gene encoding a Y-box protein showing maternal expression and tissue-specific zygotic expression in the ascidian embryos." Development Growth & Differentiation. 40. 631-640 (1998)

Wada,M.R.：“编码 Y-box 蛋白的选择性剪接基因在海鞘胚胎中显示出母体表达和组织特异性合子表达。”

Chiba,S.: "Isolation and characterizaiton of cDNA clones for epidermis-specific and muscle-specific genes in Ciona savignyi embryos." Zoological Science. 15. 239-246 (1998)

Chiba,S.：“玻璃海鞘胚胎中表皮特异性和肌肉特异性基因的 cDNA 克隆的分离和表征。”