植物細胞の脱分化に伴う糖蛋白質糖鎖の発現メカニズム変化に関する研究

植物细胞去分化相关糖蛋白糖链表达机制变化的研究

• 批准号: 06760297
• 负责人: 木村 吉伸
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06760297/
• 关键词: N型糖蛋白質糖鎖; 糖鎖生物学; 植物糖蛋白質; 脱分化細胞

植物細胞の脱分化に伴う糖蛋白質糖鎖の発現変動を糖鎖構造面から把握するために,ヒマ種子から2.4-dichlorophenoxyacetic acidによりカルス誘導(脱分化誘導)を開始し,経時的に植物組織を採取した。植物組織から水溶性糖蛋白質を調製後,ヒドラジン分解によりオリゴ糖鎖を遊離させ,N-アセチル化,ピリジルアミノ化により糖鎖を蛍光標識した。得られたオリゴ糖鎖の構造を糖鎖2次元マップ,アセトリシス,エキソグリコシダーゼ消化により決定した。その結果,脱分化前には全糖鎖構造の50%以上を占めていたオリゴマンノース型糖鎖が,脱分化に伴い減少し,キシロース,フコースを含む植物細胞に特徴的な複合型糖鎖が増加した。それら増減を示した構造の内,最も顕著に減少したオリゴマンノース型構造はMan_6GlcNAc_2であり,増加した複合型構造は,GlcNAc_<1-2>Man_3Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2であった。この結果は,植物細胞の脱分化に伴うプロセシングマンノシダーゼの活性及びGlcNAc,Xyl,Fuc転移酵素の活性昂進を示唆するものであった。植物細胞脱分化に伴うオリゴマンノース型糖鎖の減少と複合型糖鎖の増加が,細胞種間を問わず普遍的に起こる現象であるか否かを確認するために,エンドウ,ニンジン細胞を使用して糖蛋白質糖鎖の構造変化の追跡実験を開始した。まず,脱分化前の貯蔵糖蛋白質糖鎖の構造解析を行った結果,エンドウ,ニンジンともに貯蔵糖蛋白質糖鎖には,オリゴマンノース型糖鎖(Man_<5-8>GlcNAc_2)とキシロース,フコース含有型の複合型糖鎖(GlcNAc_<0-2>Man_3Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2)がほぼ等量存在することが明らかとなった。現在,カルス化した組織から得た糖蛋白質糖鎖の構造解析を行っている。

Plant cell dedifferentiation is accompanied by glycoprotein glycosaminoglycans. The sugar structure is responsible for the growth cycle, and the plant tissue starts at the beginning of the dedifferentiation pathway (dedifferentiation guide), which is the beginning of the dedifferentiation pathway. After the plant tissue was incubated with water-soluble glycoproteins, the soluble glycoproteins were isolated from the plant tissues, and the N-glycoproteins were purified. I need to know how to make the sugar. I don't know what to do. The results showed that before dedifferentiation, more than 50% of the total sugar was made, the total sugar accounted for more than 50% of the total sugar, the total sugar accounted for more than 50% of the total sugar, the total sugar accounted for more than 50% of the total sugar, the total sugar accounted for more than 50% of the total sugar, the dedifferentiation was associated with less, less, and the complex sugar was added. In the process of manufacturing, the most important information is that the most important thing is to make a Man_6GlcNAc_2 device, add a copy model, and GlcNAc_<1-2Fuctile 3Fuctile 1GlcNActure2GlcNActure2. The results showed that the activity of cell dedifferentiation and GlcNAc,Xyl,Fuc transferase in plants showed that there was an increase in the activity of cell dedifferentiation and transferase in plants. The dedifferentiation of plant cells is accompanied by the addition of complex glycoproteins, which is common in the cells. Do not confirm that the cells use glycoprotein glycoprotein glycosaminoglycans to start the cycle. Before dedifferentiation, the results of the analysis of glycoprotein glycoprotein (Man_<5-8) glycoprotein (GlcNAc_<0-2&gt), glycoprotein, glycoprotein, glyco Man_3Fuc_1Xyl_1GlcNAc_2) the same quantity exists in the same amount as that in other words. Now, the tissue tissue has obtained the result of glycoprotein analysis and analysis.

项目成果

Y.Kimura.,et al.: "N-Linked Sugar Chains of 350 kDa Royal Jelly Glycoprotein." Biosci.Biotech.Biochem.59(in press.). (1995)

Y.Kimura.,et al.：“350 kDa 蜂王浆糖蛋白的 N 连接糖链。”