唾液腺外分泌細胞におけるCa依存性Kチャネルの細胞内調節機構

唾液腺外分泌细胞Ca依赖性K通道的细胞内调节机制

• 批准号: 06770040
• 负责人: 石川 透
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770040/
• 关键词: カリウムチャネル; カルシウムイオン; イオン輸送; 唾液腺

ラット顎下腺からコラゲナーゼとデイスパーゼにより単一腺房細胞を調整し、それにパッチクランプ法を適用し以下の実験を行った。ホールセルパッチクランプ法を適用することにより単一細胞細胞膜全体のCa依存性Kチャネル電流を測定した。ピペット内溶液はG-glutamateを基本した溶液を用いた。溶液中の遊離Ca濃度は基本的に1uMとする。細胞外液はNMDG-glutamateを基本した溶液として膜電位固定により惹起されるK電流が得られるか否かを検討した。このような実験条件下で得られた電流の大部分は10mMTEAにより抑制されなく、このTEA非感受性の電流を電気生理学的に検討した。TEA10mM存在下で見られた電流の逆転電位は細胞外K濃度を変化させるとほぼK選択的電極のような振舞をしたことから、K電流であることが明らかになった。このK電流がK選択的イオンチャネルを介しているか否かを調べるために、ピペット内溶液のK-glutamateをCs-、Na-、Rb-glutamateで置換して同様な実験を行った結果、CsおよびNa置換では外向き電流は膜電位過分極側では観察できなく、逆転電位は約0mVにシフトした。一方Rb置換ではKと同様な外向き電流が観察され、逆転電位もKとほぼ同様であったことから、この電流は非選択的カチオンチャネルを介したものでないことが、明らかになった。この電流はピペット内溶液の遊離Ca濃度は100nM以下にすると完全に抑制されたことから、Ca依存性Kチャネル電流であることが明らかになった。さらにこのK電流は細胞外にBa(5mM)やquinine(1mM)を投与することに抑制された。これらの研究により明らかになったTEA非感受性、Ca依存性K電流の電気生理的性質は以前報告したラット顎下腺を用いた血管側外向きKイオン輸送の性質とよく類似していることから、本研究で示されたKチャネルが生理学的に重要な役割を果たしている事が示唆される。

For example, if you want to adjust your cell size, you can use the following methods: The Ca-dependent current of the cell membrane is measured by the method of "cell cycle" The solution is G-glutamate. The concentration of free Ca in the solution is approximately 1uM. Extracellular fluid is a basic solution of NMDG-glutamate, and membrane potential is fixed. Most of the currents obtained under these conditions are 10 mTEA, and the TEA non-responsive currents are investigated electrophysiologically. In the presence of TEA10mM, the reverse potential of the current changes with the extracellular K concentration. The K current is selected from the K group, and the K-, Na-, and Rb-glutamate in the inner solution are replaced by Cs-, Na-, and Rb-glutamate. As a result, Cs-, Na-, and Rb-glutamate in the inner solution are replaced by outward current and membrane potential. The reverse potential is about 0mV. A side Rb substitution is the same as K. A side Rb substitution is the same as K. The current is completely inhibited when the concentration of free Ca in the solution is less than 100nM. The K currents were inhibited by extracellular Ba(5mM) and quinoline (1mM). The physiological properties of TEA insensitive and Ca dependent K currents were studied in this paper. The physiological properties of K currents were similar to those reported previously.

项目成果

T.ISHIKAWA&M.MURAKAMI: "Tetraethylammuniun-insensitive,Ca^<2+>activated whole-cell K^+currents in rat submandibular acinar cells" Pflugers Arshiv. (印刷中).

T.ISHIKAWA&M.MURAKAMI：“大鼠颌下腺泡细胞中四乙胺不敏感、Ca^2+激活的全细胞K^+电流”Pflugers Arshiv。