膜結合型チロシンホスファターゼ遺伝子のクローニング

膜结合酪氨酸磷酸酶基因的克隆

• 批准号: 06770181
• 负责人: 水野 一也
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770181/
• 关键词: チロシンホスファターゼ; アイソフォーム; 細胞分化; 中枢神経系

本研究ではチロシンリン酸化を介する中枢神経系および免疫系細胞の活性化、分化制御の分子機構をチロシンホスファターゼ(PTP)の側から解明することを目指している。これまでにマウス脳cDNAライブラリーより単離し解析を進めてきたMPTPδは、細胞外に接着分子様の構造を有する膜結合型PTPである。MPTPδには、細胞外領域の構造が異なる4種類のアイソフォームが存在し、マウス脳においてはMPTPδアイソフォームが発達段階特異的に発現していることが明らかとなっていた。そこで、今年度は、神経系細胞分化における、MPTPδの役割について培養細胞系を用いて検索を行い、以下の結果を得た。(1)神経芽細胞腫由来の細胞株であるN1E115はDMSO添加により増殖を停止し神経系へ分化する。PTP阻害剤であるNa_3VO_4存在下では、この分化誘導が有意に抑制されたことより、N1E115の神経系への分化過程にPTPが関与していることが示唆された。(2)この分化誘導時におけるMPTPδおよびMTPδ近縁遺伝子の発現の変化を検討した。その結果、MTPδ遺伝子発現が減弱していたのに対し、近縁遺伝子であるLAR、PTPσの発現には、増加傾向が認められた。(3)そこで、N1E115細胞に遺伝子導入によりMPTPδ蛋白を強制発現させたところ、神経系への分化誘導が抑制され、aggregateをつくりながら増殖する形質を獲得した。現在、神経系へ分化することが報告されている他の細胞株を用いて同様の解析を進めている。以上の結果は、日本癌学会、日本分子生物学会および日本病理学会にて発表済である。

This study provides an indication of the molecular mechanisms involved in the activation and differentiation of cells in the central nervous system and the immune system. The structure of the extracellular binding molecules of MPTP delta was studied by using the method of cDNA analysis. The structure of MPTPδ is different from that of extracellular domain. There are four kinds of MPTPδ. The following results were obtained from the study of cell differentiation and MPTP delta in cultured cell lines. (1)Cell line N1E115 from which neuroblastoma was derived was cultured and differentiated by DMSO. In the presence of PTP inhibitor Na_3VO_4, the differentiation of N1E115 was inhibited intentionally. (2)The development of MPTP delta and MTP delta gene was studied during differentiation. As a result, MTP delta gene expression decreases, near gene expression decreases, and PTP delta gene expression increases (3)N1E115 cells were transformed into MPTP delta protein by stress, and the differentiation of nervous system was inhibited by aggregate. Now, the differentiation of nervous system is reported, and the analysis of other cell lines is carried out. The above results are consistent with those of the Japanese Cancer Society, the Japanese Molecular Biology Society and the Japanese Pathological Society.

项目成果

Ariyama,T.et al.: "Assignment of the human protein tyrosine phosphatase,receptor-type,zeta(PTPRZ)gene to chromosome 7q31.3." Cytogenetics and Cell Genetics.(in press).

Ariyama,T.et al.：“将人类蛋白酪氨酸磷酸酶、受体型、zeta(PTPRZ) 基因分配到染色体 7q31.3。”