肝線維化機序に関与する伊東細胞の細胞内情報伝達機構の解析

伊藤细胞参与肝纤维化机制的细胞内信号转导机制分析

• 批准号: 06770362
• 负责人: 小林 良正
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770362/
• 关键词: 肝線維化; 伊東細胞; 細胞内情報伝達機構; プロテインキナーゼC

肝の線維化に重要な役割を果たしている伊東細胞において、線維化に関与する細胞内情報伝達機構を明らかにすることを目的とし、今回は、伊東細胞の増殖および活性化やコラーゲン合成能に与えるproteinkinase C(PKC)の影響を調べ、肝線維化メカニズムにおけるPKCの関与を検討することとした。これらに関して、現在までに明らかとなった私たちの研究成果は、以下のごとくである。ラット伊東細胞をpronase-collagenase潅流法とNycodenz比重遠心法にて分離し、分離後24時間よりPKCのactivatorであるphorbolmyristate acetate(PMA)を48時間添加培養した。Western blot解析法を用いて伊東細胞の活性化の指標であるα-smooth muscle actin(α-SMA)の表出を検出し、伊東細胞の活性化を検討したところ、10nM PMAでは、α-SMAの表出は16%抑制され、100nM PMAでは、52%抑制された。一方、分離後72時間よりPMAを48時間添加培養した場合、10nM PMAでは、明らかな抑制はみられず、100nM PMAでも20%の抑制しか認められなかった。以上の結果より、伊東細胞の活性化にPKCが関与している可能性が示唆され、その関与は培養初期により大きいと考えられた。

The important role of liver maintenance in the regulation of protein C(PKC) synthesis in Ito cell culture and activation is discussed in this paper. The results of this research are as follows: Ito cells were isolated by pronase-collagenase flow method and Nycodenz specific gravity centrifugation method, and 24 hours after isolation, PKC activator and phorbolmyristate acetate(PMA) were added to culture for 48 hours. Western blot analysis was used to detect the expression of α-smooth muscle actin(α-SMA) in Ito cells as an indicator of their activity. The expression of α-SMA was inhibited by 16% at 10nM PMA, and 52% at 100nM PMA. When PMA was added 72 hours after isolation, 10nM PMA inhibited the growth of the cells, and 100nM PMA inhibited the growth of the cells by 20%. The above results show that the activation of PKC in Ito cells is related to the early stage of culture.