ミトコンドリアおよび細胞質アセトアセチル-CoAチオラーゼ欠損症の病因解析

线粒体和细胞质乙酰乙酰辅酶A硫解酶缺乏症的病因分析

• 批准号: 06770550
• 负责人: 深尾 敏幸
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770550/
• 关键词: 遺伝子解析; 遺伝子変異; β-ケトチオラーゼ; 出生前診断; cDNAクローニング; イムノブロット

1.T2欠損症の解析(1)酵素診断,蛋白解析:T2欠損症の疑いで日本を含む世界各地より送られてきた細胞の活性測定,蛋白解析を行い、第2例目、3例目の日本人患者、およびカナダ、ドイツの各1例を診断した。(2)遺伝子変異の同定:合計21症例の本症の遺伝子解析を行っている。これまでに13例の解析により17の異なった遺伝子変異を同定し、SSCP法,MDEゲル泳動法,制限酵素切断法等にて簡便な検出法を確立した。本年度得られたこれらの結果は、J.Clin.Invest.1編Human Mutation2編に公表した。またMutation Updateという依頼原稿にこれまで得られた本症の知見をまとめて公表することになっている。(3)アメリカの本症家系について、蛋白遺伝子両面から出生前診断を行った。この結果はprenatal diagnosisに公表した。胎児はcarrierで臨床に情報を還元できた。2.CT欠損症の解析(1)患者スクリーニング:本年度は残念ながらCT蛋白を欠損する患者を見出すことはできなかった。(2)cDNAスクリーニング:ヒトCT抗体用いて,ヒトCTcDNAをクローニングすることに成功し、その全塩基配列を決定することができた。この結果はBBRCに公表した。(3)CTのmRNA発現,蛋白の分布:ノーザンブロット解析によりCTmRNAが各種臓器、組織で発現しており中でも脳、肝臓で強く発現していることがわかった。イムノブロットにより肝、脳の他に副腎においても発現が著しく、CTがコレステロール合成系に強く関わっていることが明らかになった。

1. The T2 owe loss の analytical diagnosis (1) enzyme, protein resolution: T2 owe loss disease の suspected い で Japan を containing む よ from all over the world send り ら れ て き の た cells activity determination, protein analytical line を い, 2 cases of eye, 3 patients with eye の Japanese, お よ び カ ナ ダ, ド イ ツ の each 1 case を diagnosis し た. (2) The remaining 伝 child changes and the same syndrome is determined: a total of 21 cases. The remaining 伝 child of this syndrome is analyzed in the を line って る る. こ れ ま で に 13 cases の parsing に よ り の 17 different な っ た heritage 伝 sub - different を same し, SSCP method, MDE approach based ゲ ル swimming method, system of limited enzyme cut method に て simple な を 検 out the method to establish し た. For the current year, the られた れら れら られた results and the に public table in j.lin.invest. Section 1 and section 2 of Human Mutation2 are obtained, and た た. ま た Mutation Update と い う in 頼 manuscript に こ れ ま で have ら れ た の this disease knowledge を ま と め て male table す る こ と に な っ て い る. (3)アメリカ the family with this syndrome is に アメリカ て て て, and the two sides of the protein-producing 伝 offspring are を and った diagnosed before birth. The <s:1> results are prenatal diagnosisに. The common table is た. Fetal 児 児 carrierで clinical に information を return で た た た. 2. Analytical (1) patients with CT owe loss disease の ス ク リ ー ニ ン グ : this year's は remnants read aloud な が ら を owe CT protein loss す を る patients see a す こ と は で き な か っ た. (2) cDNA ス ク リ ー ニ ン グ : ヒ ト CT antibody with い て, ヒ ト CTcDNA を ク ロ ー ニ ン グ す る こ と に successful し, そ の salt base full column を decided す る こ と が で き た. <s:1> the result is に BBRCに. The public table is た. (3) CT の mRNA 発, protein の distribution: ノ ー ザ ン ブ ロ ッ ト parsing に よ り CTmRNA が various viscera, organization で 発 now し て お り in で も 脳, strong liver perforatien で く 発 now し て い る こ と が わ か っ た. イ ム ノ ブ ロ ッ ト に よ り liver, 脳 の he に adrenal に お い て も 発 が now the し く, CT が コ レ ス テ ロ ー ル GeChengXi に strong く masato わ っ て い る こ と が Ming ら か に な っ た.

项目成果

Atsushi Uchiyama: "Identification of a nonsense mutation in ALD protein cDNA trom a patient with adrenoleukodystrophy" Biochemical and Biophysical Research communications. 198. 632-636 (1994)

Atsushi Uchiyama：“从肾上腺脑白质营养不良患者中鉴定 ALD 蛋白 cDNA 中的无义突变”生物化学和生物物理研究通讯。

Toshiyuki Fukao: "Identification of a novel excnic mutation of-13 from 5′Splice site causing exon skipping in a girl with mitochondrial acetoacetyl-coenzyme A thiolase deficiency" Journal of Clinical Investigation. 93. 1035-1041 (1994)

Toshiyuki Fukao：“在患有线粒体乙酰乙酰辅酶 A 硫解酶缺陷的女孩中鉴定出 5 剪接位点的新型外显子突变 - 13，导致外显子跳跃”，临床研究杂志 93. 1035-1041 (1994)。

Toshiyuki Fukao: "Mitochondrial Acetoacetyl-coenzyme A thiolase gene:a novel 68-bp deletion involving 3′splice site of intron 7,causing exon 8 skipping in a Caucasian patient with β-ketothiolase deficiency." Human Mutation. 5. 94-96 (1995)

Toshiyuki Fukao：“线粒体乙酰乙酰辅酶 A 硫解酶基因：涉及内含子 7 的 3 剪接位点的新型 68 bp 缺失，导致患有 β-酮硫解酶缺陷的白人患者发生外显子 8 跳跃。”5. 94-96。 (1995)