Alstrom症候群におけるインスリン抵抗性糖尿病の成因に関する研究

Alstrom综合征胰岛素抵抗糖尿病的病因学研究

• 批准号: 06770564
• 负责人: 横田 一郎
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770564/
• 关键词: 糖尿病; インスリン抵抗性; インスリンシグナル

1.目的 Alstrom症候群患者の糖尿病は著しいインスリン抵抗性を伴うが、その原因は不明である。我々は、本症患者2例より採取した培養皮膚線維芽細胞を用いて、インスリン刺激後のシグナル伝達を検討した。2.方法 1)受容体インスリン結合能:^<125>I-insulinと抗インスリン受容体単クローン抗体を用いたRIA法で測定した。2)受容体β-subunitの自己燐酸化:インスリン刺激後抗インスリン受容体単クローン抗体で選別した受容体とγ-^<32>P-ATPを反応後、SDS-PAGEでβ-subunitへの^<32>Pの取り込みを測定した。3)PI-3Kの活性化:インスリン刺激後採取した細胞成分を抗IRS-1単クローン抗体で免疫沈降した後、PI及びγ-^<32>P-ATPと反応させ、生じたPI-3^<32>PをTLCで展開分離し、PI-3K活性を測定した。3.結果 1)受容体インスリン結合能は、症例1で8.0±1.2(n=3)、症例2で11.0±2.6X10^<-13>mmol/mgprotein(n=3)であり、正常対照(10.0±2.2.n=8)と差はなかった。2)β-subunitの自己燐酸化は2症例及び正常対照共に、10^<-9>Mのインスリン濃度からみられ、10^<-7>Mで最大となった。3)インスリン刺激後のPI-3K活性の変化は少なかったが、正常対照に比して2症例において活性が増加する傾向がみられた。4.考案 本症患者のインスリン受容体機能は正常であることが証明され、本症における著しいインスリン抵抗性は、細胞内シグナル伝達経路の異常によることが考えられた。細胞内で分岐するシグナルの内、糖輸送に関係すると考えられているPI-3Kの活性化は皮膚線維芽細胞では弱いため、評価が難しく、今後、MAP kinaseの活性化など他のシグナル伝達経路を含めて検討する必要がある。

1. Objective Diabetes mellitus in patients with Alstrom syndrome is characterized by resistance and unknown causes. In this study, 2 patients with this disease were treated with cultured skin line cells and treated with a combination of different treatments. 2. Method 1) Receptor-specific binding energy:^<125>I-insulin and receptor-specific antibodies were determined by RIA. 2)Receptor β-subunit self-phosphorylation: After stimulation, the receptor <32>β-subunit self-phosphorylation was determined by SDS-PAGE after selection of receptor γ-ATP<32>. 3)PI-3K activation: After stimulation, cellular components, anti-IRS-1 antibodies, immune sedimentation, PI and γ-ATP, anti-IRS<32>-1 antibodies, PI-<32>3K activation were isolated and PI-3K activity was measured by TLC. 3. Results 1) The receptor binding energy was 8.0±1.2(n=3) in case 1 and 11.0±2.6X10^<-13>mmol/mg protein (n=3) in case 2, and 10.0±2.2.n=8 in normal control group. 2)β-subunit self-phosphorylation was observed in 2 cases and normal controls, with concentrations ranging from 10^<-9>M to 10^<-7>M. 3) PI-3K activity decreased after stimulation, and increased after stimulation compared with normal control. 4. In this case, the patient's receptor function is normal, and the patient's resistance is abnormal. The relationship between intracellular differentiation and intracellular sugar transport is studied. PI-3K activation is necessary for the development and evaluation of MAP kinase activation and other intracellular sugar transport pathways.