PCR in situ hybridization法の確立について

PCR原位杂交方法的建立

• 批准号: 06770679
• 负责人: 竹内 常道
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06770679/
• 关键词: PCR; ヒト乳頭腫ウィルス; 尖形コンジローマ; ボ-エン様丘疹症

あらかじめヒト乳頭腫ウィルスDNAが検出されている尖形コンジローマ、ボ-エン様丘疹症の切片を用いて、ウィルスに特異的なプライマーでDNAを増幅した。更にビオチンでラベルされたHPV DNAプローブでin situ hybridizationを行った。凍結組織からのDNAでは充分にウィルスDNAが増幅されたが、パラフィン切片ではHPVの型によっては増幅のみられないものもあり、切片作成時のDNAの破壊や固定によるDNAの抽出のしにくさが考えられた。PCR産物を制限酵素で切断し、その切断パターンをみることによって、HPVの型判定をすることはできたが、PCR in situでは型判定は不可能であった。

The DNA of papules was detected in the sections of papules, and the DNA of papules was amplified. The HPV DNA gene was cloned in situ hybridization. The frozen DNA was extracted from the tissue and the DNA was extracted from it. PCR product restriction enzyme cut off, cut off, HPV type determination is impossible