Live vaccines based on virulence-attenuated Listera monocytogenes carrying novel plasmid vectors - a comparison of efficiency

基于携带新型质粒载体的毒力减弱的单核细胞增生李斯特菌的活疫苗 - 效率比较

• 批准号: 5266748
• 负责人: Professor Dr. Werner Goebel
• 金额: --
• 依托单位: Max-von-Pettenkofer-Institut für Hygiene und Medizinische Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5266748?language=en
• 关键词: Live; vaccines; based; virulence; attenuated

Ziel dieses Antrags ist die Entwicklung neuer Lebendimpfstoffe auf der Basis Virulenz-attenuierter Bakterien. Dazu sollen einerseits schützende Protein-Antigene direkt in das Zytosol Antigen-präsentierender Zellen (APZ) durch Trägerbakterien ausgeschleust werden. Andererseits soll Plasmid-DNA, die für derartige Antigene kodiert, durch geeignete Trägerbakterien im Zytosol von APZ freigesetzt werden. Zu diesem Zweck sollen Vektoren konstruiert werden, die die Sekretion von Antigenen mit Hilfe der Typ I-Sekretionsmaschinerie von Gram-negativen Bakterien ermöglichen, oder die Lyse der Trägerbakterien so induzieren, daß die Freisetzung der Plasmid-DNA in das Zytosol der APZ erfolgt. Durch geeignete Kombination von Vektor und bakteriellem Träger sollte sich auf diese Weise entweder eine vornehmlich humorale oder eine T-Zell-vermittelte (TH1 und/oder CTL) Immunantwort induzieren lassen. Die biologische Verträglichkeit und Sicherheit der entwickelten Lebendimpfstoffe soll kontrolliert werden. Hierzu sollen diese Impfstoffe zunächst in isolierten Makrophagen und dendritischen Zellen analysiert werden, bevor deren Wirksamkeit in vivo im Mausmodell getestet wird. Das Schicksal der Impfstämme nach nasaler bzw. oraler Applikation soll zusätzlich sowohl in vitro als auch in vivo mit Hilfe von Trägerbakterien, die mit einem, erst kürzlich konstruierten Luciferase-GFP-Fusionsprotein markiert sind, überwacht werden. Die aufgeführten Strategien sollen in Zusammenarbeit mit Prof. ter Meulen und Dr. Niewiesk zur Entwicklung eines effizienten, rekombinanten Lebendimpfstoffs gegen Masern angewendet werden.

这些陷阱是基于病毒减毒剂的新的生命力开发。在Zytosol Antigen-präsentierender Zellen（APZ）中，必须通过韦尔登进行蛋白质-抗原直接转染。此外，通过在APZ freigesetzt韦尔登的发酵液中进行转移，可获得质粒-DNA，用于检测抗原。为了使细胞溶解韦尔登，通过对革兰氏阴性细菌的I型分离机械进行抗原分离，或通过对细菌进行裂解，使APZ发酵液中的质粒DNA自由分离。将Vektor和bakteriellem Träger的组合应用于免疫接种，可使其进入体液或T-Zell-vermittelte（TH 1和/或CTL）免疫接种。生命力增强的生物学验证和安全性是韦尔登的责任。因此，我们必须对这些植入物进行韦尔登分析，然后在Mausmodell体内进行测试。这是一个非常小的缺口。体外口服固定也可在体内通过移植物进行固定，首先构建荧光素酶-GFP-融合蛋白标记物，然后韦尔登。在Zusammenarbeit由Meulen教授和Niewiesk博士共同开发的解决方案中，建议将生命力综合起来进行韦尔登。