骨折治癒過程における骨膜の役割の検討

従来より、臨床的には骨折部に圧迫力がかかると骨癒合が良いことが知られている。培養骨膜細胞における圧力の影響を解析するために、重層培養や遠心培養などの手法が考案されている。本研究では、骨膜細胞を遠心培養した。即ち、ラットの大腿骨および脛骨より骨膜を採取し、コラゲナーゼ処理した後の骨膜細胞をを経時的に遠心して細胞の形態の変化を組織学的に検討した。単層細胞では、とくに骨膜細胞の形態に変化は起こらなかったが、遠心培養では軟骨基質の合成が認められた。これは、骨膜細胞への圧迫力によって内軟骨性骨化が誘導される可能性を示唆している。また、単層培養下において種々の成長因子で刺激した後に、軟骨基質の一つであるグリコサミノグリカン(GAG)の合成を測定した。FGFあるいはPDGF刺激では増加しなかったが、TGF刺激ではGAGの合成は増加した。細胞内情報伝達物質であるCキナーゼあるいはAキナーゼの遺伝子をトランスフェクションし、これらを過剰に発現した培養骨膜細胞においても同様の検討を行った。Cキナーゼをトランスフェクションした場合には、GAGの合成は増加したが、Aキナーゼでは増加しなかった。これらの結果より、骨膜細胞は何らかの刺激により軟骨基質の合成や内軟骨性骨化を引き起こす可能性があると考えられた。しかし、いずれの刺激が最も重要であるのか、あるいは、どのような順序を経て誘導されているのか、については全く不明であり今後の研究を要すると考えられた。なお、現在の段階では、発表、雑誌論文の予定はない。

従来より、臨床的には骨折部に圧迫力がかかると骨癒合が良いことが知られている。培養骨膜細胞における圧力の影響を解析するために、重層培養や遠心培養などの手法が考案されている。本研究では、骨膜細胞を遠心培養した。即ち、ラットの大腿骨および脛骨より骨膜を採取し、コラゲナーゼ処理した後の骨膜細胞をを経時的に遠心して細胞の形態の変化を組織学的に検討した。単層細胞では、とくに骨膜細胞の形態に変化は起こらなかったが、遠心培養では軟骨基質の合成が認められた。これは、骨膜細胞への圧迫力によって内軟骨性骨化が誘導される可能性を示唆している。また、単層培養下において種々の成長因子で刺激した後に、軟骨基質の一つであるグリコサミノグリカン(GAG)の合成を測定した。FGFあるいはPDGF刺激では増加しなかったが、TGF刺激ではGAGの合成は増加した。細胞内情報伝達物質であるCキナーゼあるいはAキナーゼの遺伝子をトランスフェクションし、これらを過剰に発現した培養骨膜細胞においても同様の検討を行った。Cキナーゼをトランスフェクションした場合には、GAGの合成は増加したが、Aキナーゼでは増加しなかった。これらの結果より、骨膜細胞は何らかの刺激により軟骨基質の合成や内軟骨性骨化を引き起こす可能性があると考えられた。しかし、いずれの刺激が最も重要であるのか、あるいは、どのような順序を経て誘導されているのか、については全く不明であり今後の研究を要すると考えられた。なお、現在の段階では、発表、雑誌論文の予定はない。