权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

筋小胞体イオンチャネルの構造機能連関の解析

肌浆网离子通道的结构与功能关系分析

基本信息

批准号：
06858071
负责人：
井出徹
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06858071/
关键词：
筋小胞体イオンチャネル脂質平面膜

项目摘要

1.我々は、脂質平面膜法を検定系として、ウサギ骨格筋筋小胞体チャネルタンパクの生化学的精製に取り組んできたが、その結果、分子量138k及び100kのタンパクのみを含む分画にClチャネル活性があることを見い出した。これらの内、チャネル本体を形成するのは100kタンパクと思われ、138kタンパクはその制御因子である可能性が高いと予想された。138kタンパクの部分アミノ酸配列を数カ所について決定し、相同性の検索を行ったところ、筋小胞体膜タンパクでありカルシウム結合機能を持つと報告されている160kタンパクに、全く同一の配列があることが分かった。当初、共通の遺伝子から異なるスプライシング制御を受けて作られたものと思われたが、さらに、生化学的解析を行ったところこれら2つのタンパクは全く同一のものと判明した。分子量の違いは、前に160kタンパクの報告を行ったグループの算定ミスである可能性が高い。次に、138kタンパクの特異的抗体を作成して、筋小胞体ベシクルのイオン透過性に及ぼす効果を調べたところ(光散乱法による)、KCl透過の比較的遅い成分を阻害することが分かった。この効果がClチャネルまたはKチャネルのブロックによるものか、あるいは他の経路によるのか今のところ定かではない。2.脂質平面膜法用いて、ウサギ骨格筋横行細管(T-tubule)に存在するClチャネルの電気生理学的解析を行った。その結果、T-tubule膜には単一チャネルコンダクタンス40pSのバックグラウンドタイプ(静止電位付近でも高い開確率を示す)Clチャネルが存在することが分かった。このチャネルは電位依存性陰イオンチャネルのブロッカーとして一般に知られる9-AC,DIDS,SITS,EAで阻害されることが分かった。さらに、気管上皮細胞のClチャネル阻害剤として開発されたIAA-94によってもμM程度の濃度でブロックされることが分かった。

1. In this paper, the lipid plane membrane method is used to determine the system, and the results of the biochemical purification of the skeleton muscle cell are obtained. The molecular weight of 138k and more than 100k is determined by the molecular weight of Cl and the activity of Cl. 100k, 138k, 138k, 130 k 138k, 160 k, 138 k, 160k, 160k, In the beginning, the common gene is different from the original gene, and the common gene is different from the original gene. The molecular weight of the former 160k is very high. Second, 138k antibody-specific preparation, muscle cell structure, cell permeability and effect modulation (light scattering method), KCl transmission of a comparative component of the resistance This is the result of a series of events, such as a series of events, etc. 2. The lipid membrane method was used to analyze the electrical physiology of Cl ~(2 +) in T-tubule. As a result, the T-tubule film has a single cycle of growth at 40pS and a single cycle of growth at 40pS. 9-AC,DIDS,SITS,EA are commonly known as the resistance factors. In addition, IAA-94 was released at concentrations of μM in the plasma and in the epithelial cells.